《動(dòng)脈粥樣硬化》 四、血清Lp（α）測(cè)定法

1．原理

血漿（清）中脂蛋白（α）（Lp（α））與Lp（α）的單克隆抗體（鼠）結(jié)合形成抗原抗體免疫復(fù)合物，有濁度改變，測(cè)定溶液界質(zhì)中混濁度的光密度改變，求其血漿中Lp（α）的含量。

Lp（α）+抗人Lp（α）→抗原抗體復(fù)合物→測(cè)定光密度

2．試劑與儀器

試劑（第一化學(xué)）；Lp（α）緩沖液（R1）；Lp（α）抗體液（R2）。

儀器：生化分析儀（以CL-7200型為例）

3．操作方法

以△A=A2-A1進(jìn)行運(yùn)算Lp（α）濃度。

4．定標(biāo)：

取Lp（α）定值液，用0.9%NaCl液稀釋。

采用上述操作步驟，按免疫測(cè)定法定標(biāo)，其操作方法及標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖16-3所示。

圖16-3 Lp（α）免疫測(cè)定法的反應(yīng)過程光密度變化值mAbs（A）及其檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖（B）（CL-7200型）

上機(jī)參數(shù)（以CL-72OO型為例）

名稱LPA名稱LPA測(cè)定方法Endpoint標(biāo)準(zhǔn)（1）0.72標(biāo)本量16μl標(biāo)準(zhǔn)（2）1.44R1試劑量280μl標(biāo)準(zhǔn)（3）2.88R2試劑量40μl標(biāo)準(zhǔn)（4）5.75反應(yīng)時(shí)間第一波長5min標(biāo)準(zhǔn)（5）11.5第二波長4.99min波長1.2[340][750]

5．注意事項(xiàng)：

（1）操作時(shí)，標(biāo)本和試劑無需處理；

（2）血漿或血清標(biāo)本均可檢測(cè)。標(biāo)本置2～21℃保存1周不變；

（3）標(biāo)本濃度超過定標(biāo)最高值時(shí)，應(yīng)用生理水稀釋后再測(cè)；

（4）抗體試劑（R1）避免反復(fù)接觸；

（5）測(cè)定時(shí)避免日光直接照射。