《動脈粥樣硬化》 五、脂蛋白x的電泳分析

1．原理

血清脂蛋白x的組成中磷脂占66%，蛋白質(zhì)僅占6%，在電場中因電荷少，選擇電滲大小合適的瓊脂為電泳支持物，則LpX向陰極移動，而其他蛋白質(zhì)向陰極移動，從而達到分離的目的。用免疫沉淀法或聚陰離子沉淀法使其在瓊脂板上沉淀，對于LpX陽性的血清可以在加樣孔的陰極端見到白色沉淀帶。

2、試劑

巴比妥緩沖液500mmol/L：pH8.6,離子強度0.05。

1%瓊脂用上述巴比妥緩沖液加熱配制。

沉淀劑；每升中含MgCl20.1mol，肝素2.5g及MaCl9g。

3．儀器：電泳儀。

4．操作：

（1）制板 1%瓊脂糖加熱未冷卻前于一潔凈載玻片上均勻鋪開。凝固后在一端2cm～3cm處打孔（直徑約2.5mm）。

（2）電泳　將血清20μl加于小孔內(nèi)（勿使外溢和有氣泡）。按瓊脂糖脂蛋白電泳操作、搭橋、通電1mA、40min。

（3）漿瓊脂玻片浸在沉淀劑中30min后觀察結(jié)果（如Lp-x陽性，數(shù)min內(nèi)即出現(xiàn)沉淀線），Lp-x濃度到3.3mg/dl上即可出現(xiàn)陽性反應(yīng)。

正常值：正常人血清無Lp-x帶。

（儲建中　吳翠華）