《動脈粥樣硬化》 一、ApoB100

從1966年Margoli和Landgon開始研究ApoB100的結(jié)構(gòu)，不同實(shí)驗(yàn)室以特異性蛋白水解酶或化學(xué)裂解法研究ApoB的結(jié)構(gòu)，所得ApoB純度均不盡人意。作者曾于1986年采用特殊的沉淀抽提法獲得高純度的血清ApoB100純品，以化學(xué)裂解法在國內(nèi)首先報道了ApoB100純品的氨基酸組成，與Ologsson報道的結(jié)果基本一致，如表3-1所示。

表1 人的ApoB100的氨基酸組成

種類mol/103mol氨基酸作者制備的OlogssonAvogaroYangYangApoB100ApoLDLApoBApoB100ApoB100Lys65.2676.9±1.069.3±1.967.378.9His18.4625.1±0.519.5±1.725.423.4Arg34.9735.4±3.337.0±6.832.131.7Asp100.9683.6±1.694.5±7.4106.2103.6Thr65.1258.1±2.164.8±3.163.767.8Ser81.3072.3±1.882.0±4.081.387.1Glu120.91122.4±2.2130.1±3.1123.8117.4Pro41.0743.7±3.546.2±3.137.840.3Gly57.4554.0±2.465.3±7.948.246.3Ala111.2967.4±1.372.6±2.761.159.5Val59.4859.7±1.357.0±2.761.157.51/2Cystine6.728.0±1.414.5±2.66.75.6Met14.4519.7±0.516.7±1.418.116.4Ile61.9765.4±1.951.7±1.961.158.8Leu123.94130.7±2.5121.2±4.4118.0120.6Tyr34.5534.8±1.431.0±1.629.531.8Phe54.0155.4±2.338.4±2.652.847.6Trp未測未測未測5.76.5

1986年楊朝諭采用生物化學(xué)方法,得到人LDL的ApoB100純品并測出了ApoB100一級結(jié)構(gòu)的氨基酸排列順序,其結(jié)果與從cDNA推導(dǎo)的序列完全一致,從而解決了二十余年懸而未決的難題。

ApoB100是單鏈糖蛋白，分子量為510kD，主要在肝臟，少數(shù)在小腸合成。ApoB100包括27個（或24）氨基酸信號肽和4536個氨基酸殘基的成熟單體蛋白。1986年ApoB100的全部氨基酸殘基排列順序結(jié)構(gòu)已闡明。ApoB100分子中含有25個Cys殘基，其中有11個Cys殘基集中分布在前面500氨基酸組成區(qū)域，形成鏈內(nèi)二硫健，所以N端高度交聯(lián)成典型球形結(jié)構(gòu)，Cys殘基通過硫脂鍵與軟脂酸硬脂酸以共價鍵相結(jié)合，使ApoB牢固地連接著脂質(zhì)成份。ApoB100中對脂類結(jié)合的必要的結(jié)構(gòu)區(qū)域在2035～2506和4002～4527氨基酸殘基之間，這兩個結(jié)構(gòu)區(qū)域重復(fù)出現(xiàn)兩性親脂α-螺旋區(qū)段。另有一種結(jié)合脂質(zhì)的重要結(jié)構(gòu)是含疏水和親水性氨基酸交替排列兩性親脂β-折疊結(jié)構(gòu)，這種結(jié)構(gòu)分布在整個分子序列中，但集中于四個富含脯氨酸域，這種富含脯氨酸的重復(fù)序列是ApoB100所特有的，使ApoB100能夠?qū)⒘字瑐?cè)鏈深埋其間并使之緊密結(jié)合。由于ApoB100的兩性α-螺旋和富含脯氨酸的疏水肽及可被脂酰化的Cys殘基形成特殊結(jié)構(gòu)，使得ApoB100能夠與單層極性脂牢固地結(jié)合并有許多脂質(zhì)結(jié)合區(qū)，并使其在VLDL和LDL從分泌到被清除的整個過程中，ApoB100不在脂質(zhì)白分子間轉(zhuǎn)換，這是與其他載脂蛋白不同之處。LDL上的ApoB100結(jié)構(gòu)如圖3-1所示。

圖3-1 LDL上的ApoB100結(jié)構(gòu)圖

ApoB100生理功能有：①合成裝配和分泌富含甘油三酯的VLDL；②是LDL的結(jié)構(gòu)蛋白；③是LDL受體的配體，調(diào)節(jié)LDL從血漿中的清除速率。