中醫(yī)古籍
  • 《生物化學與分子生物學》 三、轉(zhuǎn)染

    重組的噬菌體DNA也可象質(zhì)粒DNA的方式進入宿主菌,即宿主菌先經(jīng)過CaCl2,電穿孔等處理成感受態(tài)細菌再接受DNA,進入感受態(tài)細菌的噬菌體DNA可以同樣復制和繁殖,這種方式稱為轉(zhuǎn)染(transfection)。M13噬菌體DNA導入大腸桿菌就常用轉(zhuǎn)染的方法。重組DNA進入宿主細胞也常用轉(zhuǎn)染方式。最經(jīng)典的是1973年建立的磷酸鈣法,其利用的基本現(xiàn)象是:DNA如以磷酸鈣-DNA共沉淀物形式出現(xiàn)時,培養(yǎng)細胞攝取DNA的效率會顯著提高。用電穿孔法處理培養(yǎng)的哺乳類細胞也能提高細胞攝取DNA能力,但所用外加電場的強度、電脈沖的長度等條件與處理細菌者都很不相同。近年來用人工脂質(zhì)膜包裹DNA,形成的脂質(zhì)體(Liposome)可以通過與細胞膜融合而將DNA導入細胞,方法簡單而有效,現(xiàn)有商售的脂質(zhì)體試劑,使用日益廣泛。

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