《臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)》 四、紅細(xì)胞比積測定和紅細(xì)胞平均指數(shù)的計算

（一）紅細(xì)胞比積（hematocrit,Hct）測定

[原理] 將EDTAK2抗凝血在一定條件下離心沉淀，由引而測出其紅細(xì)胞在全積壓中所占體積的百分比，稱為紅細(xì)胞比積測定。紅細(xì)胞比積的多少主要與紅細(xì)胞數(shù)量及其大小有關(guān)，紅細(xì)胞比積測定常用來診斷貧血并判斷其嚴(yán)重程度，結(jié)合有關(guān)指數(shù)變化還可推斷貧血病因，從而給恰當(dāng)?shù)闹委?。紅細(xì)胞比積測定對于相對性或絕對性紅細(xì)胞增多癥的診斷及治療觀察也有重要參考價值。

[方法學(xué)評價]測定紅細(xì)胞比積方法有多種，如折射計法、沾度法、比重測定法、離心法、電阻抗法和放射擊性核素法。后者被ICSH定為參考法，非一般實驗室所能開展。血細(xì)胞分析儀用微量血即可將紅細(xì)胞比積與其它血細(xì)胞指標(biāo)同時找印出來。離心測定紅細(xì)胞比積不夠精確的關(guān)鍵是無法完全排除壓積紅細(xì)胞之間的殘留血漿，因此測定值比真值略高，殘留量一般認(rèn)為約3%。目前溫氏法已屬淘汰之列，漸為微量高速離心法所代頂替，因其用血量少，測定時間短，效率高。而且血漿殘留量基本穩(wěn)定，精度（CV）為1%-2%，但對某些血液病樣品則血漿殘留量仍較多。血細(xì)胞分析儀僅用微量血通過電阻抗法可進(jìn)行紅細(xì)胞比積測定。由于其結(jié)果是儀器測定數(shù)千個紅細(xì)胞體積產(chǎn)生的脈沖疊加后換算的結(jié)果，因此避免了用微量高速離心法。

[參考值] 溫氏法：男：0.04-0.54;女：0.37-0.47.

微量法：男：0.467±0.039;女：0.421±0.054

[臨床意義] 紅細(xì)胞比積增高可見于大面積燒傷和各種脫水病人，測定紅細(xì)胞比積后可以了解血液濃縮程度，作為補液計算的依據(jù)。在各種貧血時，紅細(xì)胞減少，紅細(xì)胞比積常隨之減低。但可因不同性質(zhì)貧血時紅細(xì)胞大小不同，兩者的沽低不一定平行，臨床上常用HCT值計算紅細(xì)胞平均容積和紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度，有助于貧血的鑒別診斷。

（二）紅細(xì)胞三種平均值的計算

在同一抗凝血標(biāo)本中同時計數(shù)紅細(xì)胞、測定血紅蛋白量、紅細(xì)胞比積。通過這三介數(shù)據(jù)，可進(jìn)上步間接計算出平均紅細(xì)胞容積MCV、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度，以便分析病人紅細(xì)胞形態(tài)特征，有助于貧血的分類與鑒別。

1．平均紅細(xì)胞容積（meancorpuscular volume,MCV）

MCV=每升血液中紅細(xì)胞比積/每升血液中紅細(xì)胞個數(shù)=PCV×103×1012/RBC/Lfl（飛升）

[參考值] 手工法：80-92fl(1mi=1012fl),

血液分析法：80-100fl

例：紅細(xì)胞3.50×1012/L，紅細(xì)胞比積0.36,則：

MCV=0.36×103×1012/3.50×1012=103fl

2．平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量MCH=每升血液中血紅蛋白含量/每升血液中紅細(xì)胞個數(shù)Hb(gL)×1012/RBC/L×PG（皮克）

[參考值] 手工法：27-31pg(1g=1012pg)

血液分析儀法：27-34pg

例：紅細(xì)胞3.5×1012/L,血紅蛋白120g/L(12g/dl),則

MCH=120×1012/3.5×1012=34.2PG

3．平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度MCHC=每升血液中血紅蛋白含量/每升血液中紅細(xì)胞比積=Hb/(g/L)/Hct

[參考值] 320-360g/L

例：血紅蛋白120g/L,紅細(xì)胞比積0.36,則：

MCHC=120/0。36=333G/L

（三）三種紅細(xì)胞平均值的臨床意義

紅細(xì)胞檢測是貧血診斷和療效觀察必在的實驗手段。不同病因引起的貧血，各項參數(shù)變化也不同。了解貧血的病因與病理生理變化，對于正確使用、合理分析各項試驗結(jié)果至關(guān)重要。

骨髓造血活動與造血組織中造血干細(xì)胞（稱為CFU-S）的存在有密切關(guān)系。造血干細(xì)胞具有自我復(fù)制和分化成各系祖細(xì)胞（包括紅、粒、單核、淋巴系統(tǒng)）等的能力。造血干細(xì)胞的增殖和分化又和造成血微環(huán)境有密切聯(lián)系。造血干細(xì)胞向紅系方分化過程中，經(jīng)歷了一個受爆增型紅細(xì)胞集落刺激因子與受紅細(xì)胞生成素作用的階段，這個階段中的細(xì)胞抵消紅系祖細(xì)胞，EPO可以影響這些細(xì)胞的增殖活動，刺激血紅蛋白的合成，關(guān)推進(jìn)向紅系細(xì)胞分化。EPO的濃度和培養(yǎng)時間不同，可形成BFU-E和CFU-E兩種不同的集落。實BFU-E和CFU-E是紅系祖細(xì)胞中兩類性質(zhì)不完全豐同的細(xì)胞亞群，它們在分化中的大致順序是CFU-S→BFU-E→…CFU-E→原紅細(xì)胞……網(wǎng)織紅細(xì)胞→成熟紅細(xì)胞。由于某些物理、化學(xué)或生物學(xué)因素?fù)p傷了CFU-S或使干細(xì)胞賴以生存的骨髓微環(huán)境受到破壞干細(xì)胞不能向紅系轉(zhuǎn)化而形成的貧血稱之為再生障礙性貧血，或由于骨髓腫瘤（白血病、骨髓瘤）、骨髓纖維化使紅系祖細(xì)胞條件進(jìn)一步成熟致成骨髓病性貧血。如果紅系祖細(xì)胞受到損傷導(dǎo)致選擇性紅細(xì)胞生成障礙或因腎損傷EPO生成減少使紅系祖細(xì)胞不能進(jìn)一步分化，成熟導(dǎo)致貧血，臨床上分別自然數(shù)為單純紅細(xì)胞性再障礙和腎性貧血。由于上述病因只是作用在細(xì)胞分化階段，并未影響細(xì)胞的增殖和成熟過程，故成熟的紅細(xì)胞形態(tài)正常，上述貧血均屬正細(xì)胞正色素性，從原細(xì)胞發(fā)育為成熟紅細(xì)胞在經(jīng)過4次分裂，最后生成16個紅細(xì)胞，這一過程中至少有兩個方面變化---核與胞質(zhì)。所謂核的變化是指DNA要不斷復(fù)制，使細(xì)胞進(jìn)入增殖周期，加速細(xì)胞分裂，由于某種原因便例如葉酸或維生素B12缺乏，DNA復(fù)制所需酶的缺陷或由于抗腫瘤藥物的作用的阻斷DNA復(fù)制均影響幼紅細(xì)胞的分裂從而導(dǎo)致的貧血自然數(shù)為巨幼細(xì)胞性創(chuàng)貧血。胞質(zhì)的改變體現(xiàn)在血紅蛋白不斷合成上。血紅蛋白合成需要三個要素鐵、卟啉和珠蛋白，其中任何一種物質(zhì)缺乏，均可導(dǎo)致血紅蛋白合減低，細(xì)胞內(nèi)充盈沽少，細(xì)胞體積小并呈明顯大小不等，以小細(xì)胞為主，形成小細(xì)胞低色素性貧血，旯常見的是缺鐵性貧血。成熟的紅細(xì)胞可在以外周血中生存120開，衰老的紅細(xì)胞被單核巨噬細(xì)胞所吞噬、破壞、脾在破壞紅細(xì)胞方面尤占重要地位。紅細(xì)胞生存期和紅細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)、紅細(xì)胞內(nèi)酶系統(tǒng)及血紅蛋白分子等不密切關(guān)系。其中某一方面缺陷即可導(dǎo)致紅細(xì)胞生理或形態(tài)異常，壽命縮短。如膜結(jié)構(gòu)異常導(dǎo)致紅細(xì)胞呈球形、橢圓形、口形、血紅蛋白異常使紅細(xì)胞呈靶形或鐮形，使之不能通地這脾而夭折，臨床上稱為溶血性貧血。無論急性或慢性出血都是臨床上引起貧血的最常見原因，慢性失血性貧血實質(zhì)上就是缺鐵性貧血。

從以上所述不難看出，不同病因引起的貧血，可使紅細(xì)胞產(chǎn)生形態(tài)的變化。反之，如果用實驗的手段，檢查紅細(xì)胞形態(tài)特點就可協(xié)助臨床尋找病因，為治療提供依據(jù)。MCV、MCH、MCHC可從不同側(cè)面反映紅細(xì)胞的病理變化。根據(jù)在某一病例中。三個指數(shù)的變化情況，可將貧血分為大細(xì)胞性貧血、正常細(xì)胞性貧血、小細(xì)胞低色素性貧血及單純小細(xì)胞性貧血，其及標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)致該類貧血病因見表2-3。

表2-3 貧血的形態(tài)學(xué)分類鑒別表

貧血的形態(tài)學(xué)分類MCV（FL）MCH（PG）MCHC（G/L）病因正常細(xì)胞性貧血80～10027～34320～360急性失血、急性溶血、造血功能低下（再障）大細(xì)胞性貧血大于100大于34320～360缺乏葉酸維生素B12引起巨幼細(xì)胞性貧血單純小紅細(xì)胞性貧血小于80小于27320～360尿毒癥、慢性炎癥小紅細(xì)胞低色素性貧血小于80小于27小于慢性失血性貧，缺鐵性貧血