《動脈粥樣硬化》 四、粘連蛋白的提取

提取粘連蛋白的基本原理是用NaCl脫氧膽酸鈉液提取血管壁中的粘連蛋白，再用高鹽除去雜質(zhì)，然后進一步用Sephacryl層析純化，方法如下：

1．將動脈血管壁組織加10倍體積處理液（0.05mol/lTris-HCL pH7.6、0.5%核酸酶），4℃攪拌20min，10kr/min離心10min。

2．沉淀用含0.05mol/L Tris-HCl pH7.6、0.5%PMSF、10%甲醇液，洗滌2次，10kr/min離心10min。

3．沉淀物中，加40倍體積處理液（0.05mol/lTris-HCl pH7.6、0.5%PMSF、0.5mol/LNaCl,）4℃過夜后，10kr/min離心10min。

4．上清用PEG6000濃縮，最后加入已平衡好的SephacrylS-3000層析柱上，用0.05mol/L Tris-HCl pH7.6、0.5%NaCl洗脫，第一峰即為粘連蛋白。