《醫(yī)學免疫學》 三、細胞因子的檢測

細胞因子檢測是判斷機體免疫功能的一個重要指標，因而具有重要的實驗室研究價值，同時還可能在臨床上有諸多實用價值、包括許多疾病的診斷、病程觀察、療效判斷及細胞因子治療監(jiān)測等。但是，由于細胞因子在體內(nèi)的含量甚微，給細胞因子的檢測帶來困維。目前細胞因子的主要檢測方法包括：

（一）依賴性細胞株

一些腫瘤細胞株必須依賴于細胞因子方能在體外增殖，如DTLL細胞株依賴IL-2；FDC-PL細胞株依賴于小鼠IL-3；TF-1細胞株依賴于人IL-3和人GM-CSF，因而可利用這些依賴細胞株檢測相應的細胞因子。這種方法敏感性高，特異性也不錯，但可異的是并非所有細胞因都能找到相應的細胞株，因而限制了它的應用。

（二）功能檢測

利用一些細胞因子的功能特性，可建立相應的活性測定方法，如干擾素的抑制病毒感染效應，腫瘤壞死因子對L929細胞的殺傷作用等。這樣的方法敏感性高，但特異性不夠，容易受一些擾因素的影響。

（三）免疫測定

利用抗原抗體反應的原理，制備出抗細胞因子的單克隆抗體或多克隆抗體，可進行細胞因子的免疫檢測。這種方法的優(yōu)點是特異性強、操作簡便，缺點是靈敏度不夠，且不能代表活性測定的結果。從目前的國際發(fā)展趨勢來看，已研制出了高靈敏度、特異性高、高度配套的細胞檢測試劑盒，其應用范圍正在擴大，有良好的發(fā)展前景。

（四）功能測定與抗體抑制

為解決功能定特異性不夠，免疫測定靈敏度不夠的問題，可將兩種方法結合起來，利用各自的長處，有可能得到較為可靠的結果。在這一方法中，所用的抗細胞因子抗體必須是具有中和活性的抗體。

（五）分子雜交技術

利用分子生物學技術，制備出細胞因子的基因探針，可通過分子雜交技術檢測細胞內(nèi)細胞因子mRNA的表達，這是一種高度敏感和高度特異的檢測技術，目前在實驗室研究中使用較廣，其缺點是操作較為繁瑣，測定結果只能代表細胞因子基因的表達，而不能代表活性細胞因子的水平。

（六）多聚酶鏈反應技術（PCR）

PCR（polymerasechain reation)技術是一種高效的基因體外擴增技術，目前PCR技術已用于細胞因子的檢測中，首先將細胞因子產(chǎn)生細胞的RNA提取出來，再經(jīng)逆轉錄合成cDNA，以cDNA為模板，在細胞因子引物的引導下，即可進行PCR擴增。這種技術是迄今最敏感的細胞因子檢測技術，操作也較簡便，缺點與分子雜交技術類似，并且不容易對細胞因子表達水平進行定量。