《細胞和分子免疫學》 （一）CD4陽性細胞群

1.Th1和Th2亞群　應(yīng)用Th細胞克隆培養(yǎng)技術(shù)和細胞因子產(chǎn)生的不同，已發(fā)現(xiàn)小鼠CD4陽性細胞群是一個不均一的亞群，可分為Th1和Th2，主要區(qū)別見表7-6。

Th1細胞能合成IL-2、IFN-γ、，LT、IL-3、TNF-α和GM-CSF，但不能合成IL-4、IIL-5、IL-6、IL-10和IL-13；而Th2能合成TNF-α、IL-3、GM-CSF、IL-4、IL-5、IL-6、IIL-10（細胞因子合成抑制因子，CSIF）和IL-13，不能合成IL-2、IFN-γ和LT。此外Th1和Th2都能分泌三巨噬細胞炎癥蛋白和前腦啡肽原。Th1和Th2都能輔助B合成抗體，但輔助的強度和性質(zhì)不同。體外實驗表明，IL-4明顯促進B細胞合成和分泌IgE，如使LPS刺激小鼠B細胞合成IgE能力增強10-100倍。少量IFN-γ能完全陰斷IL-4對IgE合成的促進作用。Th2分泌IL-4對IgE合成有正調(diào)節(jié)作用，而Th1分泌IFN-γ則起負調(diào)節(jié)作用。此外，Th2通過分泌IL-4和IL-5輔助IgA合成，分泌IL-10（CSIF）,抑制Th1細胞合成細胞因子，而Th1對IgG1合成則有抑制作用，但輔助其它幾種類型Ig的合成。由于Th1和Th2合成淋巴因子的種類不同，因而介導不同的超敏反應(yīng)。IL-3和IL-4均能促進肥大細胞增殖，且相互有協(xié)同作用，IL-5除輔助B細胞合成IgA外，還能刺激骨髓嗜酸性粒細胞的集落形成，因而Th2與速發(fā)型超敏反應(yīng)關(guān)系密切。Th1通過產(chǎn)生IFN-γ阻斷IgE合成，對速發(fā)型超敏反應(yīng)有抑制作用。Th1與遲發(fā)型超敏反應(yīng)有關(guān)，可能與IL-2、IFN-γ等對巨噬細胞活化和促進CTL分化作用有關(guān)，此外LT也有直接殺傷靶細胞作用。兩群Th克隆均能誘導抗原提呈細胞（APC）表達MHCⅡ類抗原，Th1通過IFN-γ誘導Mφ表達Ia抗原，而Th2通過IL-4對Mφ和B細胞Ia抗原表達起正調(diào)節(jié)作用。在人類Th1和Th2細胞亞群尚未得到最后證實。從目前發(fā)表資料來看，CD4+CD45RO+前體細胞向Th2效應(yīng)細胞分化，而IFN-γ則對前體細胞向Th2分化過程起抑制作用，因此IL-4和IFN-γ在決定CD4+CD45RO+前體細胞向Th1或Th2分化過程中起著重要的調(diào)節(jié)作用。人T細胞經(jīng)多克隆活化后，在CD4陽性細胞中IL-4mRNA陽性比便不到5%，而60%的CD4+細胞有IFN-γ和IL-2mRNA的轉(zhuǎn)錄。

表7-6　小鼠Th1和Th2亞群的比較

Th1Th2合成淋巴因子種類IL-2+-IFN-γ+-LT+-IL-3++TNF-α++GM-CSF++IL-4-+IL-5-+IL-6-+IL-10-+IL-13-+輔助B細胞+++輔助IgE合成-+促進肥大細胞增殖-+介導超敏反應(yīng)類型遲發(fā)型速發(fā)型促進Ia表達細胞MφB，Mφ

介導遲發(fā)型超敏反應(yīng)（delayedtype hypersensitivity,DTH）的T細胞亞群稱為TDTH，表面標志CD3+CD4+CD8-，可能相當于小鼠的Th1亞群。當曾被變應(yīng)原致敏的TDTH再次與變應(yīng)原相遇后，可釋放出多種細胞因子，參與遲發(fā)型（Ⅳ型）超敏反應(yīng)的發(fā)生。

表7-7　TDTH釋放細胞因子參與遲發(fā)型超敏反應(yīng)

作用對象細　胞　因　子生物學活性巨噬細胞巨噬細胞趨化因子（MCF）招引、聚集、活化巨噬細胞，巨噬細胞移動抑制因子（MIF）增強巨噬細胞吞噬和殺傷功能巨噬細胞活化因子（MAF）IFN-γ白細胞白細胞移動抑制因子（LIF）招引、聚集白細胞淋巴細胞IL-2淋巴細胞局部浸潤、增殖IFN-γ增強殺傷功能皮膚血管皮膚反應(yīng)因子（SRF）增加血管通透性靶細胞淋巴毒素（LT）殺傷靶細胞

MCF: macrophagechemotactic factor

MIF: macrophage migrationinhibition factor

MAF: macrophage activating factor

LIF: leukocyte migrationinhibitory factor

SRF: skin reactive factor

LT: lymphotoxin

2.抑制細胞誘導亞群和輔助細胞誘導亞群　應(yīng)用CD45RA、CD45RO、CD29和CD31單克隆抗體可將CD4陽性細胞群分為抑制細胞誘導亞群和輔助細胞誘導亞群。兩個亞群的表面標志和功能比較見表7-8。

（1）CD31：最近發(fā)現(xiàn)CD31是一種新的、激活后表達水平不發(fā)生明顯變化的抑制細胞誘導亞群的表面標記。CD31是一種血小板-內(nèi)皮細胞胞粘附分子（PECAM,gpⅡa），分子量為140kDa，其結(jié)構(gòu)屬于免疫球蛋白超家族成員。從外周血新鮮分離的CD4細胞中，CD31McAb主要與CD45RA亞群反應(yīng)，對B細胞合成IgG輔助作用不明顯，對ConA和自身MHC（自身MLR）反應(yīng)較為敏感；而CD31-的CD4細胞群中，發(fā)現(xiàn)有大量輔助B細胞合成IgG的活性和對某些抗原刺激的回憶反應(yīng)。CD45RA+的CD4細胞大激活后，盡管細胞表面丟失CD45RA，但表面CD31的表達仍不發(fā)生明顯變化；而CD45RO+CD45RA-的CD4細胞激活后不能獲得CD31表達。由于CD31在CD4細胞激活后仍不變化，對于鑒別抑制細胞誘導亞群和輔助細胞誘導亞群是一種有用的標志。

迄今為止，許多粘附分子如CD11a/CD18(LFA-1),LFA-3,CD2和CD29（VLAβ鏈）主要表達在CD45RO+T細胞表面。而CD31則表達在CD45RA+CD4細胞表面?？笴D31McAb作用于naive T細胞能觸發(fā)其VLA-4介導的粘附作用。內(nèi)皮細胞表面CD31及其配體與T細胞表面CD31及其配體相互作用很可能觸發(fā)整合素介導的粘附作用。CD31如何參與CD45RA+CD4+T細胞功能以及誘導抑制性T細胞產(chǎn)生還有待進一步研究。

（2）CD45：CD45為異構(gòu)型分子。CD45細胞膜外部多肽鏈可由A、B和C三種外顯子編碼。人幼稚T細胞只表達被抗CD45RA識別的CD45A型；記憶T細胞不表達任何A、B、C外顯子產(chǎn)物而被抗CD45RO識別?？笴D45RA和抗CD45RO識別的都是休止型細胞，抗CD45RO所識別的記憶T細胞往往也可低水平表達一系列活化表面標記，如CD25、MHCⅡ類抗原、CD54、CD26等，提示這類細胞可能新近被激活過，由此推論記憶T細胞可能是由于持久性抗原或交叉抗原的低劑量、持續(xù)刺激得以維持其長時間存活。體外實驗觀察到細胞活化后見有從CD45RA向CD45RO的單向性轉(zhuǎn)變，這與幼稚T細胞向記憶T細胞分化相平行。

表7-8　抑制細胞誘導亞群和輔助細胞誘導亞群的比較

抑制細胞誘導亞群輔助細胞誘導亞群表　型　CD4++CD29低密度高密度CD31+-CD45CD45RACD45RO粘附分子(LFA、）++++增殖功能++++CD3McAb++++++++抗原刺激再次反應(yīng)-+++同種異體抗原++++++自身MLC++++誘導和輔助功能輔助B細胞產(chǎn)生抗體±+++誘導Ts+++-誘導細胞介導的淋巴細胞溶解作用（CML）±+++細胞發(fā)育階段天然（naive）記憶（memory）

（3）自身混合淋巴細胞反應(yīng)：外周血B細胞和單核細胞等非T細胞在體外培養(yǎng)時能誘導某些自身T細胞發(fā)生增殖反應(yīng)，稱為自身混合淋巴細胞的應(yīng)（autologous mixed　lymphocyte reaction　,AMLR）。這一部分T細胞稱為自身反應(yīng)性T細胞。作為刺激細胞的B細胞和單核細胞主要是通過其細胞表面的MHCⅡ類抗原來刺激自身反應(yīng)性T細胞，在體外培養(yǎng)時加入抗MHCⅡ類抗原的抗體可阻斷AMLR。關(guān)玩弄AMLR的生理意義尚不清楚，可能是機體的一種免疫調(diào)節(jié)機制。