四軍醫(yī)大西京醫(yī)院研究證明：GS能誘導白血病K562細胞凋亡

日前，由第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院血液科等單位的研究人員完成的一項國家自然科學基金資助項目證明，氨基葡萄糖硫酸鹽（GS）能誘導白血病K562細胞凋亡。這一研究成果，為臨床治療白血病提供了理論依據(jù)。

現(xiàn)已證明，許多抗腫瘤藥物能誘導腫瘤細胞凋亡，Caspase（天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶）和bcl-2家族等分子在其中起重要作用。Caspase-3的活化是凋亡的早期現(xiàn)象，能啟動細胞的凋亡損害。bcl-2基因是最早發(fā)現(xiàn)和研究較多的細胞凋亡抑制基因，其功能是抑制細胞凋亡，當細胞凋亡時其表達減少。

氨基葡萄糖硫酸鹽（GS）是在氨基葡萄糖單體的基礎上進行結構修飾而得到的。為探討GS對慢性髓系白血病K562細胞凋亡的誘導作用和分子機理，研究人員采用臺盼藍拒染法測定細胞生長曲線來觀察GS對K562細胞的生長抑制作用。取對數(shù)生長期K562細胞，以0.5、1.0、5.0毫摩爾/升不同濃度的GS作用48小時后，利用細胞計數(shù)、電鏡、吖啶橙/溴化乙啶（AO/EB）染色、DNA梯狀電泳、流式細胞儀等方法來觀察GS對K562細胞的抑制效應和促凋亡作用，并用West鄄ernblot檢測活化的Caspase-3和bcl-2基因的表達。

研究結果發(fā)現(xiàn)，0.5、1.0、5.0毫摩爾/升濃度的GS對K562細胞的生長抑制作用具有時間和劑量依賴性。隨著藥物作用時間的延長和劑量的增加，GS對K562細胞的增殖抑制作用越明顯(P<0.01)。光鏡、電鏡和AO/EB染色顯示，5.0毫摩爾濃度的GS作用K562細胞后，出現(xiàn)典型的凋亡形態(tài)學改變。AnnexinV染色后流式細胞儀能檢測到早期凋亡細胞，細胞周期顯示：G1期細胞百分率增高，S期降低，并有凋亡峰；有明顯的梯狀DNA。同時，GS誘導K562細胞凋亡后出現(xiàn)活化的Caspase-3，而bcl-2蛋白表達減少，甚至消失。

研究結果表明，GS抑制慢性粒細胞白血病細胞的增殖可以通過誘導白血病細胞凋亡來實現(xiàn)的。GS能夠下調bcl-2蛋白水平和激活Caspase-3，推測GS誘導K562細胞凋亡的作用是通過線粒體途徑，下調bcl-2，改變跨膜電位，促進膜通透孔開放，激活Caspase-3而完成的。