中藥防治肝纖維化研究取得進(jìn)展

由河北醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院流行病學(xué)博士生導(dǎo)師劉殿武教授主持完成的“活血化瘀中藥治療肝纖維化作用靶點(diǎn)和機(jī)制的研究”，因在探索預(yù)防和治療肝纖維化理想中藥、作用機(jī)制及查找肝纖維化發(fā)生相關(guān)基因等方面取得重要進(jìn)展，于日前獲得了河北省科技進(jìn)步二等獎。

慢性肝病如果得不到有效治療，可經(jīng)肝纖維化發(fā)展為肝硬化、門脈高壓、肝性腦病甚至肝癌。眾多研究表明，肝纖維化是可以逆轉(zhuǎn)的，但發(fā)展到肝硬化就不可逆轉(zhuǎn)了。因此，阻止肝纖維化向肝硬化進(jìn)展非常重要。但是目前尚無療效明確的抗肝纖維化的西藥，中藥雖在阻斷、逆轉(zhuǎn)肝纖維化方面有獨(dú)特優(yōu)勢，很多研究也驗(yàn)證了這一點(diǎn)，但尚未開發(fā)出用于臨床的藥物。

鑒于這種情況，劉殿武根據(jù)中醫(yī)驗(yàn)方，選用丹參、當(dāng)歸、莪術(shù)、三棱、鱉甲、土鱉蟲、郁金等具有活血化瘀、軟堅散結(jié)作用的中藥，組成活血化瘀中藥方劑抗纖1號。他應(yīng)用四氯化碳（CCL4）、高脂飲食和乙醇等復(fù)合因素制作成肝纖維化大鼠模型后，將這些大鼠隨機(jī)分為中藥組、中藥加硒組、西藥（秋水仙堿或凱西來）組和空白對照組，采用多種現(xiàn)代醫(yī)學(xué)方法，從分子水平對該藥的療效、作用靶點(diǎn)和機(jī)制、現(xiàn)代制劑以及肝纖維化相關(guān)基因等進(jìn)行了系統(tǒng)研究，并獲得多項(xiàng)重要發(fā)現(xiàn)。

一是在肝功能和肝纖維化指標(biāo)及肝組織病理變化方面，中藥組改善程度明顯優(yōu)于空白對照組和西藥對照組，而且膠囊制劑的效果優(yōu)于水煎醇提制劑；中藥加硒組的效果優(yōu)于單純中藥組；全方中藥的效果明顯優(yōu)于其中3味中藥組方的效果。光鏡和電鏡觀察顯示，應(yīng)用中藥后，肝組織的病變程度比西藥對照組、空白對照組明顯減輕，中藥組肝纖維化處于Ⅰ級和Ⅱ級，西藥對照組處于Ⅱ級和Ⅲ級，空白對照組處于Ⅲ級和Ⅳ級。Masson染色觀察顯示，西藥對照組和空白對照組有大量膠原沉積，而中藥組膠原沉積明顯減少；全方中藥應(yīng)用后肝組織病理改善程度明顯優(yōu)于其中3味中藥組方的效果。

二是在肝維化發(fā)生過程中相關(guān)基因的表達(dá)方面，中藥應(yīng)用后能夠明顯增加肝細(xì)胞生長因子和肝再生增強(qiáng)因子基因的表達(dá)，其表達(dá)量大于西藥對照組，中藥加硒組表達(dá)量大于單純中藥組，表明此中藥方劑通過增加兩種基因的表達(dá)促進(jìn)肝細(xì)胞的再生，而且硒和中藥聯(lián)合應(yīng)用效果更好。肝纖維化大鼠經(jīng)中藥治療后，Ⅰ、Ⅲ型膠原基因和蛋白表達(dá)量及轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）基因和蛋白表達(dá)量均明顯低于空白對照組和西藥對照組；核因子-кB（NF-кB）的表達(dá)量明顯低于空白對照組和西藥對照組，免疫組化和原位雜交均顯示中藥組胰島素樣生長因子I受體(IGF-1)表達(dá)量明顯低于空白對照組和西藥對照組；應(yīng)用中藥后金屬蛋白酶組織抑制因子-I（TIMP-1）基因表達(dá)量明顯減少。

三是在免疫功能變化方面，中藥治療肝纖維化后，能顯著降低脾指數(shù)，增加胸腺指數(shù)；明顯提高紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)率，降低紅細(xì)胞免疫復(fù)合物受體花環(huán)率；明顯增加CD4細(xì)胞數(shù)量和CD4/CD8比值；而且還能明顯降低血清循環(huán)免疫復(fù)合物含量，增加吞噬細(xì)胞的吞噬功能。

四是在細(xì)胞凋亡方面，活血化瘀中藥血清可明顯抑制肝星狀細(xì)胞增殖，并誘導(dǎo)其凋亡，凋亡率明顯高于西藥對照組，中藥與硒聯(lián)合應(yīng)用后作用更明顯。說明該活血化瘀中藥方劑和硒通過抑制肝星狀細(xì)胞的增殖、誘導(dǎo)其調(diào)亡，使細(xì)胞外基質(zhì)合成減少，肝纖維化減輕。

五是在查找肝纖維化發(fā)生相關(guān)基因方面，經(jīng)應(yīng)用mRNA差異顯示技術(shù)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)了數(shù)條與肝纖維化發(fā)生相關(guān)的基因片斷。