雌激素受體和絕經(jīng)的研究進(jìn)展

摘要：雌激素受體（ER）是一類有配體激活的核轉(zhuǎn)錄因子，介導(dǎo)大部分的雌激素反應(yīng)。研究ER的作用機(jī)制，有助于深入了解雌激素的不用靶器官效應(yīng)。近年來(lái)，有關(guān)雌激素受體的報(bào)道層出不窮，尤其是兩種受體亞型的組織學(xué)定位及其與婦科內(nèi)分泌的關(guān)系，已普遍認(rèn)為ER廣泛存在于體內(nèi)多個(gè)器官、與絕經(jīng)期及絕經(jīng)后相關(guān)疾病有著密切的關(guān)系。本文綜述了雌激素受體兩種受體亞型ERα和ERβ及其與絕經(jīng)相關(guān)疾病的研究進(jìn)展。

自從發(fā)現(xiàn)了雌激素受體（ER），對(duì)其組織學(xué)定位、表達(dá)、功能及與絕經(jīng)相關(guān)疾病關(guān)系的研究就不斷深入，近些年來(lái)取得了重要進(jìn)展。ERα和ERβ廣泛存在于兩性生殖器官、心、腦、骨、腎等組織。雌激素結(jié)合后在不同器官發(fā)揮特異的作用?，F(xiàn)就ER的結(jié)構(gòu)、分布、功能及ER與絕經(jīng)相關(guān)疾病關(guān)系的研究進(jìn)展做一綜述。1ER

1.1ER的亞型和結(jié)構(gòu)

以前ER的研究?jī)H限于ERα，直到1996年，分別從人類和大鼠前列腺組織中分離出與雌激素有高度親和力的受體ERβ，從此對(duì)ER的分子生物學(xué)研究進(jìn)入了一個(gè)新階段。

Enmark等發(fā)現(xiàn)人類ERβ基因位于14q22-24處；ERα基因在6號(hào)染色體。ERβ基因遠(yuǎn)小于ERα，前者約40kb，后者為140kb，因內(nèi)含子長(zhǎng)度不同所致。ERα蛋白含595個(gè)氨基酸，ERβ蛋白含530個(gè)氨基酸，分子量為59.2kD，為核受體超家族成員。受體分6個(gè)結(jié)構(gòu)域，從N端至C端分別為A-F，其受體蛋白分4個(gè)功能域，轉(zhuǎn)錄激活功能域：對(duì)應(yīng)于A/B段及E/F段；兩處分別命名為AF-1和AF-2；DNA結(jié)合域（DBD）：對(duì)應(yīng)于C段；配基結(jié)合域（LBD）：亦對(duì)應(yīng)于E/F段；受體蛋白變構(gòu)過(guò)程中的鉸鏈區(qū)對(duì)應(yīng)于D段、人類兩種ER

1.2ER的組織分布和功能

1.2.1泌尿生殖器官

用RT－PCR和免疫組化方法在人和大鼠的泌尿生殖道均可檢測(cè)到ERα和ERβmR NA及其蛋白質(zhì)；原位雜交顯示輸卵管、子宮、陰道上皮以表達(dá)ERα為主，ERβ表達(dá)微弱；卵巢以表達(dá)ERβ為主[1],大部分存在于顆粒細(xì)胞，這說(shuō)明在卵泡生長(zhǎng)和成熟的調(diào)節(jié)過(guò)程中主要是ERβ介導(dǎo)了雌激素的活性。

ERα敲除的雌性鼠（ERαknockout,ERKO）不能受孕，子宮對(duì)雌二醇治療無(wú)反應(yīng)，卵巢含出血卵泡。ERβ敲除的雌性鼠（ERβkockout,BERKO）已經(jīng)生育了下一代的BERKO雌性鼠，幼鼠似乎在卵泡發(fā)育和排卵方面受到影響，雌性BERKO鼠子宮與 ERKO鼠比較解剖上似乎是正常的。雌性ERKO鼠雌二醇含量提高了10倍，黃體生成素和卵泡刺激素含量也增加，可以看出ERα調(diào)節(jié)著血清雌激素水平，推測(cè)BERKO鼠有正?；驇缀跽５拇萍に睾蚅H/FSH含量。在異位子宮內(nèi)膜組織的上皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞中均有兩種ERmRNA表達(dá)。

1.2.2心血管系統(tǒng)和骨

血管平滑肌細(xì)胞主要表達(dá)ERβ，ERα表達(dá)微弱[2]。實(shí)驗(yàn)證明，雌激素能抑制無(wú)ERα基因小鼠的血管損傷反應(yīng)，說(shuō)明雌激素通過(guò)ERβ抑制血管增生。ER存在于成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞，在鼠成骨細(xì)胞和骨肉瘤中有ERβmRNA。大量文獻(xiàn)報(bào)告了雌激素對(duì)絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松的作用。

缺乏ERα的男性病人伴有低的骨密度，并且持續(xù)的線性增長(zhǎng)，用雌激素治療后骨密度無(wú)改變。芳香化酶缺乏的男性和女性病人也存在上述現(xiàn)象，但用雌激素治療后骨密度增加。據(jù)此推測(cè)ERα在骨的發(fā)育、成熟和礦物質(zhì)沉積方面起重要作用；Sims NA[3]等研究發(fā)現(xiàn)，在男性，僅有ERα參與調(diào)節(jié)骨重建，而在女性，兩種受體亞型相互補(bǔ)償，共同調(diào)節(jié)此過(guò)程。

對(duì)BERKO鼠研究發(fā)現(xiàn)，BERKO雌性鼠相對(duì)于野生型鼠增加了皮質(zhì)骨形成，成年雌性BERKO鼠骨小梁有較高的礦物質(zhì)含量，顯示ERβ在成年雌性鼠中與骨小梁的調(diào)節(jié)有關(guān)，認(rèn)為ERβ抵抗了ERα 在骨形成中的刺激作用[4]。

1.2.3中樞神經(jīng)系統(tǒng)

大量有關(guān)ERβ的研究提示ERβ主要分布于下丘腦、視前區(qū)、小腦扁桃體、中腦水管、海馬CA1區(qū)等區(qū)域，在許多區(qū)域ERα和ERβ共同存在。但在CA1區(qū)和齒狀回E Rα的分布很少。最近研究[5]表明，雌激素與大腦的學(xué)習(xí)、記憶、情感以及運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)功能有關(guān)。

2ER和絕經(jīng)相關(guān)疾病

圍絕經(jīng)期婦女，由于卵巢功能逐漸降低，體內(nèi)雌激素水平降低，常出現(xiàn)更年期癥狀，包括月經(jīng)紊亂，精神、神經(jīng)癥狀如潮熱、出汗、精神過(guò)敏、情緒不穩(wěn)定等，泌尿生殖道萎縮，心血管系統(tǒng)的變化和骨質(zhì)疏松，嚴(yán)重影響絕經(jīng)后婦女的生存質(zhì)量。Zofkova I[6]等研究發(fā)現(xiàn),ER基因型不僅在受體水平且在激素合成水平上決定性腺系統(tǒng)的功能，而這種關(guān)系的病理遺傳學(xué)在絕經(jīng)相關(guān)疾病如骨質(zhì)疏松中的作用尚未明確。研究ER和相關(guān)疾病的關(guān)系為絕經(jīng)相關(guān)疾病的預(yù)防治療提供了理論依據(jù)。

2.1ER和絕經(jīng)后生殖道疾病

研究表明：陰道組織的ERα、β表達(dá)在絕經(jīng)前和絕經(jīng)后有明顯差別，ERβ在絕經(jīng)期明顯降低，不管其是否接受HRT[7]。

Jazaeri AA等用RT-PCR和免疫印跡法對(duì)絕經(jīng)前后子宮內(nèi)膜的ERα/βmRNA做了分析，結(jié)果示絕經(jīng)前（4.9）和絕經(jīng)后（27.3）有顯著差異，這主要是因?yàn)榻^經(jīng)后ERβ表達(dá)降低所致。而絕經(jīng)后內(nèi)膜癌患者的ERα 下降明顯[8]。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，ER基因多態(tài)性可能與絕經(jīng)后某些不甚明確的癥狀有關(guān)。

2.2ER與絕經(jīng)后心血管疾病

婦女絕經(jīng)后的心血管病的發(fā)病率為絕經(jīng)前的2-3倍。絕經(jīng)后婦女應(yīng)用雌激素補(bǔ)充療法使心血管病的發(fā)生率明顯下降。提示雌激素對(duì)心血管具有保護(hù)作用。雌激素是通過(guò)與血管壁上特異的雌激素受體結(jié)合,影響特異蛋白質(zhì)的DNA合成，調(diào)節(jié)血管平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的許多功能,影響血管的收縮、舒張，發(fā)揮其特有的生物效應(yīng)。雌激素可通過(guò)改善脂代謝,降低總膽固醇和低密度脂蛋白(LDL),增加高密度脂蛋白(HDL)的含量,其引起的血脂變化,可能對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化起到一定防止作用。而近10多年來(lái)許多學(xué)者通過(guò)雌激素與男性冠心病的臨床對(duì)照研究,認(rèn)為高雌激素血癥可能是男性冠心病的危險(xiǎn)因素。

對(duì)ER的功能研究發(fā)現(xiàn)無(wú)動(dòng)脈粥樣硬化的停經(jīng)前婦女冠狀動(dòng)脈ER表達(dá)高于患有動(dòng)脈粥樣硬化的婦女。最近也證明了羊中ER的活化增加了冠脈血流和心輸出量。

Ros enson等用隨機(jī)、雙盲設(shè)計(jì)原則，檢測(cè)了23位（三組）絕經(jīng)后婦女血漿粘滯度，一組單用雌激素，另一組雌孕激素合用，還有一組對(duì)照；結(jié)果單用雌激素組的血漿粘滯度明顯低于雌孕激素合用組（P<0.05）。而血漿粘滯度的增加是心血管疾病的發(fā)生和慢性心臟病患者死亡的重要先兆，進(jìn)而提示雌激素與ER結(jié)合后可能降低絕經(jīng)后婦女血漿粘滯度以減少心血管病危險(xiǎn)性。去卵巢2個(gè)月后大鼠主動(dòng)脈的ER表達(dá)顯著減少,補(bǔ)充雌激素或補(bǔ)充雌、孕激素能使去卵巢大鼠主動(dòng)脈ER的含量維持在正常水平,這可能是雌激素對(duì)絕經(jīng)后婦女心血管保護(hù)作用的機(jī)制之一。

2.3ER與絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松

雌激素水平降低是絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松發(fā)病的首要原因，老化并不是骨質(zhì)疏松的主要因素。在此基礎(chǔ)上，Albright等首先提出雌激素可用于防治絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松。

長(zhǎng)期以來(lái)，人們一直認(rèn)為雌激素對(duì)骨的作用是間接的，1988年Komm在成骨細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)了ER，明確了雌激素對(duì)骨細(xì)胞的直接作用（通過(guò)ER）。1990年P(guān)enlser又在破骨細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)了雌激素受體；更加證明了雌激素對(duì)骨細(xì)胞的直接作用。

王欽紅等人在2000年用DEXA、PCR-RFLP分別用測(cè)量了健康的絕經(jīng)后婦女的骨密度值和ER基因PvuII酶切位點(diǎn)的多態(tài)性，ANOVA分析顯示，Troch部位的骨密度值與 ER基因PvuII酶切位點(diǎn)的多態(tài)性呈顯著相關(guān)。目前對(duì)ER基因多態(tài)性與絕經(jīng)后骨丟失的關(guān)系尚需進(jìn)一步驗(yàn)證。小鼠實(shí)驗(yàn)顯示，

(1)卵巢切除后骨量丟失可能與單核細(xì)胞表達(dá)ER量減少,使單核細(xì)胞向破骨細(xì)胞的分化增多,而使骨吸收增強(qiáng)有關(guān)。

(2)激素替代治療可能通過(guò)調(diào)節(jié)單核細(xì)胞數(shù)及其ER的表達(dá)而起抗骨質(zhì)疏松的作用。

2.4ER和絕經(jīng)后中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病

神經(jīng)流行病學(xué)研究結(jié)果顯示，絕經(jīng)期前的女性比同年齡男性的卒中發(fā)生率低，而絕經(jīng)后女性卒中發(fā)病率明顯升高。雌激素替代治療可使絕經(jīng)后與卒中相關(guān)的死亡率和相對(duì)危險(xiǎn)度下降。此外絕經(jīng)后雌激素替代治療對(duì)絕經(jīng)后婦女的阿爾茨海默病、絕經(jīng)后抑郁、怕金森病也起到預(yù)防和保護(hù)作用。有關(guān)于雌激素的腦保護(hù)作用目前知之較少，體外細(xì)胞培養(yǎng)研究發(fā)現(xiàn)，雌激素的抗氧化作用優(yōu)于維生素E，且能阻斷谷氨酸的興奮毒作用和DNA變性，似與ER無(wú)關(guān)。但是，在卵巢切除后的雌性鼠下丘腦和海馬，ERβ/ERα要比切除前高，從而顯示了ERβ在調(diào)節(jié)雌激素在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用中扮演著十分重要的角色。

對(duì)不同性別、年齡的下丘腦背側(cè)視上核的ERα、β研究顯示：在核組化染色中，年輕女性AVP部位含有分泌ERβ的神經(jīng)原的數(shù)目是年輕男性的50倍、年老女性的250倍。另外，在胞漿染色中，年輕女性ERβ也較男性和年老女性表達(dá)高。而對(duì)于 ERα，四組陽(yáng)性神經(jīng)原的數(shù)目無(wú)明顯差異，但是ERα的性別，年齡影響則與ERβ恰恰相反。此項(xiàng)結(jié)果首次表明了在絕經(jīng)后婦女視上核精氨酸加壓素（AVP）神經(jīng)原，ERβ表達(dá)明顯降低，ERα明顯升高。據(jù)此推測(cè)雌激素受體的變化可能參與了絕經(jīng)后婦女AVP神經(jīng)原的活性。近來(lái)發(fā)現(xiàn)ER兩種亞型皆存在于調(diào)節(jié)生物節(jié)律的視交叉上核[9]，提示絕經(jīng)前后ER亞型的改變可能與更年期癥狀有關(guān)。

2.5其它

日本Shimizu I等研究了丙型肝炎病毒相關(guān)的肝細(xì)胞癌和絕經(jīng)前后肝細(xì)胞中ER 表達(dá)的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)絕經(jīng)后ER降低且肝細(xì)胞癌發(fā)病率明顯升高，從而說(shuō)明了女性絕經(jīng)前可能通過(guò)ER防止肝細(xì)胞癌（HCC）作用[10]。:絕經(jīng)后Ⅱ型糖尿病的發(fā)病可能與雌二醇及ER的下降有關(guān)。尼爾雌醇治療使絕經(jīng)后患者的白細(xì)胞雌激素受體增加,可能有利于絕經(jīng)期婦女免疫功能的改善。3展望

目前對(duì)ER與絕經(jīng)期相關(guān)癥狀疾病的關(guān)系所知甚少，廣泛表達(dá)的ER說(shuō)明其可能具有重要的生理及病理學(xué)意義，因而對(duì)ER的跨學(xué)科多范圍的研究必將成為新的熱點(diǎn)。例如絕經(jīng)前后兩種受體亞型在性腺軸表達(dá)及對(duì)配體親和力的差異就具有重要的研究?jī)r(jià)值，它將進(jìn)一步指導(dǎo)新型抗雌激素藥物開(kāi)發(fā)，新一代的雌激素替代藥物以及雌激素受體拮抗劑將具有更高的效能、不良反應(yīng)更小，可大大提高雌激素相關(guān)疾病的內(nèi)分泌治療效果，改善圍絕經(jīng)期婦女的生活質(zhì)量。