《免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗》 二、IL-2的檢測

IL-2的檢測方法主要有兩大類，一類是細胞增殖法，另一類是免疫學(xué)檢測法。

（一）細胞增殖法

IL-2可刺激某些淋巴細胞增殖，根據(jù)細胞增殖情況可反映IL-2的活性，結(jié)果以U/ml表示。目前所用的IL-2反應(yīng)細胞主要有CTLL、CTB6、F12、CTLL-2等小鼠IL-2依賴細胞株以及ConA活化的小鼠淋巴母細胞和小鼠胸腺細胞。這類細胞的增殖情況均可通過顯微鏡下直接計數(shù)、3H-TdR摻入法以及MTT法加以測定。

1．依賴性細胞株增殖法IL-2依賴細胞株在IL-2存在時才能生長，而對PHA、ConA等促有絲分裂原及IL-2以外的其它細胞因子均無反應(yīng)。CTLL-2對IL-2的依賴性最強，表現(xiàn)為在單獨培養(yǎng)時3H-TdR的摻入量低，而在IL-2存在時摻入值高，故為首選的靶細胞株。

2．T淋巴母細胞增殖法T細胞經(jīng)植物血凝素激發(fā)轉(zhuǎn)化為T淋巴母細胞，并表達豐富的IL-2受體，在體外IL-2存在時持續(xù)增殖，并與IL-2含量呈劑量依賴關(guān)系。

3．胸腺細胞增殖法IL-2可以增另ConA的促有絲分裂原作用而引起T血細胞大量增殖。將一定數(shù)量的小鼠胸腺細胞與亞刺激量的ConA和不同稀釋的待檢標本共育，在一定時間后檢測IL-2增殖情況即能代表IL-2的活性。胸腺細胞增殖試驗是目前檢測IL-2活性最簡便的方法。此法缺點是敏感性較差，如待測標本中存留有ConA會出現(xiàn)較強的非特異性反應(yīng)等。

（二）免疫學(xué)檢測法

根據(jù)抗原－抗體反應(yīng)的原理，可利用抗IL-2的單克隆或多克隆抗體直接測定樣品中的IL-2含量，結(jié)果用ng/ml表示。本法在rIL-2生產(chǎn)制備過程中可用以跟蹤檢測，在rIL-2基因克隆時亦可對陽性質(zhì)粒進行初步篩選。