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根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體以及凝集反應(yīng)的方式,間接凝集反應(yīng)可分為4類:
1.(正向)間接凝集反應(yīng)用抗原致敏載體以檢測(cè)標(biāo)本中的相應(yīng)抗體(圖13-1)。
圖13-1(正向)間接凝集反應(yīng)原理示意圖
2.反向間接凝集反應(yīng)用特異性抗體致敏載體以檢測(cè)標(biāo)本中的相應(yīng)抗原(圖13-2)。
圖13-2反向間接凝集反應(yīng)原理示意圖
3.間接凝集抑制反應(yīng)診斷試劑為抗原致敏的顆粒載體及相應(yīng)的抗體,用于檢測(cè)標(biāo)本中是否存在與致敏抗原相同的抗原。檢測(cè)方法為將標(biāo)本先與抗體試劑作用,然后再加入致敏的載體,若出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,說(shuō)明標(biāo)本中不存在相同抗原,抗體試劑未被結(jié)合,因此仍與載體上的抗原起作用。如標(biāo)本中存在相同抗原,則凝集反應(yīng)被抑制(圖13-3)。同理可用抗體致敏的載體及相應(yīng)的抗原作為診斷試劑,以檢測(cè)標(biāo)本中的抗體,此時(shí)稱反向間接凝集抑制反應(yīng)。
圖13-3間接凝集抑制反應(yīng)原理示意圖
A:標(biāo)本中含抗原B:標(biāo)本中不含抗原
4.協(xié)同凝集反應(yīng)協(xié)同凝集反應(yīng)(coaggoltination)與間接凝集反應(yīng)的原理相類似,但所用載體既非天然的紅細(xì)胞,也非人工合成的聚合物顆粒,而是一種金黃色葡萄球菌。它的菌體細(xì)胞壁中含有A蛋白(staphylococcusprotienA,SPA)。SPA具有與IgG的Fc段結(jié)合的特性,因此當(dāng)這種葡萄球菌與IgG抗體連接時(shí),就成為抗體致敏的顆粒載體。如與相應(yīng)抗原接觸,即出現(xiàn)反向間接凝集反應(yīng)。協(xié)同凝集反應(yīng)也適用于細(xì)菌的直接檢測(cè)。
在間接凝集反應(yīng)中,可用作載體的顆粒種類很多,常用的有動(dòng)物或人紅細(xì)胞、細(xì)菌和多種惰性顆粒如聚苯乙烯膠乳(polystyrenelatex)、皂土(bentonite)及明膠顆粒、活性炭、火棉膠等。在臨床檢驗(yàn)中最常用的為間接血凝試驗(yàn)和膠乳凝集試驗(yàn)。
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根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體以及凝集反應(yīng)的方式,間接凝集反應(yīng)可分為4類:
1.(正向)間接凝集反應(yīng)用抗原致敏載體以檢測(cè)標(biāo)本中的相應(yīng)抗體(圖13-1)。
圖13-1(正向)間接凝集反應(yīng)原理示意圖
2.反向間接凝集反應(yīng)用特異性抗體致敏載體以檢測(cè)標(biāo)本中的相應(yīng)抗原(圖13-2)。
圖13-2反向間接凝集反應(yīng)原理示意圖
3.間接凝集抑制反應(yīng)診斷試劑為抗原致敏的顆粒載體及相應(yīng)的抗體,用于檢測(cè)標(biāo)本中是否存在與致敏抗原相同的抗原。檢測(cè)方法為將標(biāo)本先與抗體試劑作用,然后再加入致敏的載體,若出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,說(shuō)明標(biāo)本中不存在相同抗原,抗體試劑未被結(jié)合,因此仍與載體上的抗原起作用。如標(biāo)本中存在相同抗原,則凝集反應(yīng)被抑制(圖13-3)。同理可用抗體致敏的載體及相應(yīng)的抗原作為診斷試劑,以檢測(cè)標(biāo)本中的抗體,此時(shí)稱反向間接凝集抑制反應(yīng)。
圖13-3間接凝集抑制反應(yīng)原理示意圖
A:標(biāo)本中含抗原B:標(biāo)本中不含抗原
4.協(xié)同凝集反應(yīng)協(xié)同凝集反應(yīng)(coaggoltination)與間接凝集反應(yīng)的原理相類似,但所用載體既非天然的紅細(xì)胞,也非人工合成的聚合物顆粒,而是一種金黃色葡萄球菌。它的菌體細(xì)胞壁中含有A蛋白(staphylococcusprotienA,SPA)。SPA具有與IgG的Fc段結(jié)合的特性,因此當(dāng)這種葡萄球菌與IgG抗體連接時(shí),就成為抗體致敏的顆粒載體。如與相應(yīng)抗原接觸,即出現(xiàn)反向間接凝集反應(yīng)。協(xié)同凝集反應(yīng)也適用于細(xì)菌的直接檢測(cè)。
在間接凝集反應(yīng)中,可用作載體的顆粒種類很多,常用的有動(dòng)物或人紅細(xì)胞、細(xì)菌和多種惰性顆粒如聚苯乙烯膠乳(polystyrenelatex)、皂土(bentonite)及明膠顆粒、活性炭、火棉膠等。在臨床檢驗(yàn)中最常用的為間接血凝試驗(yàn)和膠乳凝集試驗(yàn)。