《免疫學和免疫學檢驗》 三、火箭免疫電泳

火箭免疫電泳技術(shù)又稱作單向電泳擴散免疫沉淀試驗，它是由單向擴散發(fā)展起來的一項定量技術(shù)，實質(zhì)上是加速度的單向擴散。在含抗體的瓊脂板一端打一排抗原孔；加入待測標本后，將抗原置陰極端，用橫距2～3mA/cm的電流強度進行電泳。抗原泳向陽極，在抗原抗體比例恰當處發(fā)生結(jié)合沉淀。隨著泳動抗原的減少，沉淀逐漸減少，形成峰狀的沉淀區(qū)，狀似火箭（圖12-11）?？贵w濃度保持不變，峰的高度與抗原量呈正比，用標本中的抗原含量。

圖12-11火箭電泳圖

①②③為標本；④⑤⑥為標準抗原

火箭電泳操作時應注意以下幾點：

1．所用瓊脂可選擇無電滲或電滲很小的，否則火箭形狀不規(guī)則。

2．注意電泳終點時間，如火箭電泳頂部呈不清晰的云霧狀或圓形皆提示未達終點。

3．標本數(shù)量多時，電泳板應先置電泳槽上，搭橋并開啟電源（電流要?。┖笤偌訕?。否則易形成寬底峰形，使定量不準。

4．作IgG定量時，由于抗原和抗體的性質(zhì)相同，火箭峰因電滲呈紡綞狀。為了糾正這種現(xiàn)象，可用甲醛與IgG上的氨基結(jié)合（甲?；?，使本來帶兩性電荷的IgG變?yōu)橹粠щ姾?，加快了電泳速度，抵消了電滲作用，而出現(xiàn)伸向陽極的火箭峰。

火箭電泳作為抗原定量只能測定μg/ml以上的含量，如低于此水平則難于形成可見的沉淀峰。加入少量125I標記的標準抗原共同電泳，則可在含抗體的瓊脂中形成不可見的放射自顯影技術(shù)。根據(jù)自顯影火箭峰降低的程度（競爭法）可計算出抗原的濃度。放射免疫自顯影技術(shù)可測出ng/ml的抗原濃度。