《臨床生物化學(xué)》 第三節(jié)　基因治療

80年代初美國加州大學(xué)Cline首次對β-蛛蛋白生成障礙性貧血患者進(jìn)行基因治療嘗試時遭到人們的非議，但時隔10年，分子生物學(xué)飛速發(fā)展，改變了人們的思維。1990年9月14日，在馬里蘭州貝塞斯達(dá)國家保健研究所醫(yī)療中心，一位因患遺傳性腺苷脫氨酶（adenosine deaminase，ADA）缺乏癥導(dǎo)致抵抗力下降的4歲女孩，接受了W、費(fèi)仁茲、安德烈等醫(yī)生用經(jīng)處理的腺病毒為載體，將正常ADA基因?qū)牖純旱陌准?xì)胞中，并表達(dá)了正常的ADA，成為第一個接受基因治療并獲成功的患者。此后兩年中，她僅患過一次感冒。

近來基因研究不斷深入，基因治療的概念也有所發(fā)展，不僅可導(dǎo)入正?；蛞约m正遺傳性疾病的基因缺陷，也可導(dǎo)入特定的DNA、RNA片段以封閉或抑制特定基因的表達(dá)，即反義技術(shù)治療腫瘤或病毒感染等疾病。

實施基因治療首先應(yīng)具備以下條件：了解疾病發(fā)生的分子機(jī)制，診斷分子生物學(xué)技術(shù)的正確應(yīng)用與基因診斷臨床應(yīng)用，在此基礎(chǔ)上分離、克隆正?；蚧蛴兄委熥饔玫暮怂崞?。選擇高效的載體系統(tǒng)與目的基因重組。選擇適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞，接受正?；虿⒒剌?shù)交颊唧w內(nèi)適度表達(dá)，發(fā)揮特定的治療作用。

反義技術(shù)基因治療是利用反義核酸細(xì)胞作用，導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)抑制或封閉基因表達(dá)的技術(shù)。反義核酸是指與異常表達(dá)或過度表達(dá)的目的基因或目的基因mRNA互補(bǔ)，并以堿基配對的方式與目的基因序列結(jié)合的核酸，它可以在復(fù)制、轉(zhuǎn)錄核酸剪接加工，mRNA轉(zhuǎn)運(yùn)及翻譯水平上抑制目的基因的表達(dá)，達(dá)到治療的目的。

反義核酸用于基因治療發(fā)展較快，如反義核酸最佳作用靶點(diǎn)的選擇，采用化學(xué)修飾方法提高反義核酸在細(xì)胞內(nèi)的穩(wěn)定性，常用硫（S）修飾，形成硫代反義核酸，為了便于反義核酸導(dǎo)入細(xì)胞，反義核酸常只有10-30bp大小。有時還用脂質(zhì)體或微囊包裝反義核酸，或以逆轉(zhuǎn)錄病毒作為載體等，提高反義核酸的穩(wěn)定性和導(dǎo)入效率，從而提高治療效果。

雖然基因治療已部分應(yīng)用于臨床并獲得成功，但尚屬研究階段，導(dǎo)入基因的穩(wěn)定性，表達(dá)時效等問題尚待解決。特別是外來基因?qū)胍鸬膫惱碛懻撋袩o定論，在此僅做簡述，但我們深信基因治療在遺傳性疾病，腫瘤等疾病的治療上，將產(chǎn)生深遠(yuǎn)的意義。基因治療的迅速發(fā)展給基因診斷提出了新的課題、新的要求，我們必須努力開發(fā)簡便易行的診斷分子生物學(xué)技術(shù)，以滿足發(fā)展的需要。