《基因診斷與性傳播疾病》 第二節(jié)　基因結(jié)構(gòu)

一、基因組結(jié)構(gòu)

HSV-2基因組為雙鏈線性DNA分子，堿基組成含69%G+C，分子量為96×106D。根據(jù)基因組兩個(gè)通過共價(jià)鍵相連的分別被稱為L(zhǎng)（長(zhǎng)）和S（短）的組分的方位不同，HSV-2DNA可有四種異構(gòu)體。L組分包括82%的病毒DNA，并且有一獨(dú)特序列“U”，其兩側(cè)有一反轉(zhuǎn)重復(fù)區(qū)域ab或b′a′，分別含6%病毒DNA。S組分占18%的病毒DNA，也有一獨(dú)特序列（US），其兩側(cè)亦有反轉(zhuǎn)重復(fù)序列a′c′和ca。a′c′和ca分別含4.3%DNA。彼此相關(guān)的L和S序列的倒置衍生于位點(diǎn)特異性重組，重組是由末端“a”序列區(qū)的病毒基因產(chǎn)物介導(dǎo)的。HSV-2DNA兩端可連接成環(huán)狀，此結(jié)構(gòu)與病毒的致癌與潛伏有關(guān)。HSV-2DNA中L和S的末端重復(fù)序列主要編碼特定的即刻早期轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，而獨(dú)特序列主要編碼特定的早期及晚期多肽和糖蛋白。

HSV-2有三類基因，即α、β、γ。其中α基因在感染中最早表達(dá)且不需要前病毒蛋白的合成；β基因的感染需要α蛋白的預(yù)先合成；γ基因的表達(dá)需要病毒DNA的復(fù)制?，F(xiàn)已證實(shí)HSVmRNA可合成三類基本蛋白：急早期（immediate early，α）、早期（early，β）和晚期（late，γ）蛋白，β蛋白在DNA復(fù)制中起作用，包括胸苷激酶，DNA多聚酶及大多數(shù)DNA結(jié)合蛋白，而大部分糖蛋白則多為γ蛋白。HSV-2蛋白合成呈連鎖調(diào)節(jié)，即α基因產(chǎn)物誘導(dǎo)β基因表達(dá)，而β基因產(chǎn)物（加上一種α蛋白ICOP4）反過來又可終止α基因表達(dá)，同時(shí)誘導(dǎo)γ基因的表達(dá)，γ基因產(chǎn)物則可負(fù)調(diào)節(jié)β基因的表達(dá)并且可作為下一輪病毒復(fù)制合成α蛋白的起始信號(hào)。

迄今為止，已有6個(gè)編碼糖蛋白的基因已定位于HSV-2線性位點(diǎn)上，其基因產(chǎn)物分別被命名為gB、gC、gD、gE、gG和gH，編碼gB、gC的基因位于UL區(qū)，而編碼gD、gE、gG和gH的US區(qū)。

二、與誘導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)化有關(guān)的基因定位

Aurelian對(duì)所有實(shí)驗(yàn)中HSV-2感染的細(xì)胞株（包括腫癌細(xì)胞株）作了分析，發(fā)現(xiàn)病毒DNA共有的序列僅兩處，一處是Bg1ⅡG片段，位于0.21-0.33圖單位,該DNA序列與感染細(xì)胞在低血清培養(yǎng)劑中的增殖有關(guān),而與病毒致癌無關(guān);另一處是Bg1ⅡC片段,位于0.45～0.58圖單位,能誘導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)化.HSV-2誘導(dǎo)倉鼠胚胎成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化的DNA區(qū)域位于Bg1Ⅱ/Hpal-CD片段,相當(dāng)于0.44～0.52圖單位.HSV-2DNA的Bb1ⅡN片段位于0.58～0.63圖單位,為形態(tài)學(xué)轉(zhuǎn)化區(qū),已知0.58～0.628中無特定的編碼功能.L+K-細(xì)胞株或3T3tk-細(xì)胞株能通過HSV-2感染轉(zhuǎn)化成TK+表型,導(dǎo)致轉(zhuǎn)化所需的HSV-2DNA序列位于0.28-0.32圖單位。