《動脈粥樣硬化》 第二十四章　DNA的克隆與序列測定

近20年來分子克隆技術(shù)的發(fā)展突飛猛進，重組DNA操作技術(shù)包括的范圍不斷擴大，DNA克隆的方法亦多種多樣，特別是PCR技術(shù)的應(yīng)用，以及RFLP、SSCP等技術(shù)的開展，使得DNA克隆技術(shù)的應(yīng)用日益廣泛。

DNA克隆技術(shù)在動脈粥樣硬化等疾病的病因及診療研究中也有重要的作用。例如在研究脂蛋白酯酶基因發(fā)生的特異突變時，可以設(shè)計合成擴增引物，進行模板DNA的PCR擴增，所得的PCR產(chǎn)物較小，僅有300多bp，且純度不足以進測序。為了對此突變序列進行測序分析，就可以采用DNA克隆的方法，將此PCR產(chǎn)物連接到細菌質(zhì)粒上，再進一步純化后測序，以便鑒定脂蛋白酯酶的突變序列。

下面簡要介紹DNA克隆和測序的常用方法。