《動脈粥樣硬化》 二、酶法

1．原理

磷脂酶D因特異性不高，能水解血清中卵磷脂，溶血卵磷脂和神經(jīng)磷脂（三者占血清總磷脂的95%），釋放出膽堿，膽堿在膽堿氧化酶作用下生成甜菜堿和H2O2，在過氧化物酶作用下，H2O2，4-氨基安替比林、酚發(fā)生反應(yīng)生成紅色醌亞胺化合物，其顏色深淺與這三種磷脂的含量成正比，在500nm波長下比色計算結(jié)果為：

2．試劑

（1）酶應(yīng)用液（參考配方）：每100mlTris-His緩沖液（50mmol/L，pH7.8）中含：

(2)標(biāo)準(zhǔn)液：純卵磷脂，臨用前配制，5mg/2.5ml蒸餾水（含TritonX-1000.5%）

3．操作

（1）標(biāo)本采集：空腹12h抽靜脈血，不抗凝，分離血清或抗凝血分離血漿。

（2）在3.0ml酶應(yīng)用液中加入血清（漿）20μl，標(biāo)準(zhǔn)管加標(biāo)準(zhǔn)液20μl，空白管加水20μl，放置37℃水浴10min后，波長500nm，比色，空白管液調(diào)零。

4．計算

血清磷脂（mg/dl）=TA/SA×200

血清磷脂（mmol/L）=血清磷脂（mg/dl）×0.01292