《動脈粥樣硬化》 一、Abell-Kendall改良法

1．原理

血清加入醇溶性氫氧化鉀，使膽固醇從脂蛋白中分離出來，同時使膽固醇酯加水分解成游離膽固醇，加石油醚振搖、抽提，使膽固醇移入石油醚層，分離并取一定量的石油醚層，蒸發(fā)至干，再進(jìn)行Liebermann-Burchard 顯色反應(yīng)，620nm比色定量。該法可用于基本功訓(xùn)練及組織細(xì)胞膽固醇的提取定量。

2．試劑組成

代號種類濃度組　成貯存2～8℃有效時間R1乙醇優(yōu)質(zhì)純R2石油醚沸點(diǎn)68℃，特級純R3水醋酸分析純R4無水醋酸膽固醇分析用，不含HCIR5濃硫酸分析純R6KOH液33%(W/W)KOH10g+H2O20mlR7乙醇性KOH液R194ml+R66ml臨用前配制R8Liebermann配制后BurchardR420體積+R51體積+R310體積1h試劑*內(nèi)用完R9膽固醇標(biāo)準(zhǔn)液5.17mmol/L膽固醇標(biāo)準(zhǔn)品200mg+R1→100ml

*：在三角燒瓶內(nèi)，加入無水醋酸，于冰水中冷至10℃以下，再慢慢加入濃硫酸，混合，靜置10min，又加冰醋酸混勻，備用。

3．操作

圖15-1 血清膽固醇（Abell法）測定操作圖

按圖15-1操作。

4．計算

標(biāo)準(zhǔn)總膽固醇濃度=ESA/EST×5.17(mmol/L)