《動脈粥樣硬化》 三、以載脂蛋白組成作脂蛋白顆粒分類

傳統(tǒng)的脂蛋白分類是根據(jù)其密度和電泳行為分類，但是每一類脂蛋白不僅密度、大小、脂蛋白比是不均一的，載脂蛋白的組成也不同，載脂蛋白是唯一具有化學(xué)和免疫學(xué)獨立特性的脂蛋白的組成部分，所以要進(jìn)行準(zhǔn)確的脂質(zhì)運轉(zhuǎn)研究，用傳統(tǒng)的以物理性質(zhì)分類的方法是有缺陷的。

Alaupovic提出將載脂蛋白組成作為鑒定脂蛋白顆粒的標(biāo)志及脂蛋白分類的基礎(chǔ)。每個脂蛋白顆粒只含一種載脂蛋白稱為單脂蛋白，如LDL中多數(shù)脂蛋白只含ApoB100，稱為脂蛋白B（LpB）；若含有二種或二種以上不可分離的載脂蛋白叫復(fù)脂蛋白，如LDL中的脂蛋白顆粒含有ApoB、CI、CⅡ和CⅢ，稱為LpB：CⅠ：CⅡ：CⅢ（LpB：C）。單脂蛋白和復(fù)脂蛋白是大顆粒脂蛋白體系中基本的化學(xué)實體，可以有不同的密度、大小、脂/蛋白比，但載脂蛋白的性質(zhì)不變，具有特定的功能和代謝特征。

按Alaupovic提出的分類方法，ApoA和ApoB組成不同兩類主要的脂蛋白顆粒，前者主要存在于HDL，而后者主要存在于VLDL和LDL中，每種都可分為單脂蛋白和復(fù)脂蛋白。含有ApoA的脂蛋白顆粒主要有LpAⅠ和LpAⅠ：AⅡ，含ApoB的脂蛋白顆粒有LpB，LpB：E，LpB：C，LpB：C：E和LpAⅡ：B：C：D：E等。

分離脂蛋白顆粒的方法主要是免疫親和層析。

（1）含ApoA脂蛋白顆粒的分離：從ApoAⅡ抗血清提取免疫球蛋白（IgG），用抗ApoAⅡ-IgG與吸附劑交聯(lián)制備免疫吸附柱，用pH7.0磷酸鹽緩沖液平衡，將新鮮血清或HDL過柱，柱上保留的部分為LpAⅡ和LpAⅠ：AⅡ，濾出未保留的部分主要為Lpa Ⅰ，用3mol/L硫氰酸鈉洗脫LpAⅡ和LpAⅠ：AⅡ，透析。分別將保留的部分洗脫的部分，通過抗ApoAⅠ-IgG交聯(lián)的吸附柱，分離LpAⅠ、LpAⅠ：AⅡ、LpAⅡ和其他脂蛋白顆粒。用免疫擴(kuò)散及免疫電泳方法鑒定LpAⅠ和LpAⅠ：AⅡ的載脂蛋白的組成。血漿中大約35～45%的ApoAⅠ存在于LpAⅠ，而55～60%存在于LpAⅠ：AⅡ，LpAⅠ占總的含ApoA脂蛋白的20～28%，LpAⅠ：AⅡ占72～80%，與LpAⅠ：AⅡ相比，LpAⅠ具有較高的膽固醇和較低的蛋白質(zhì)組成，LpAⅠ和LpAⅠ：AⅡ的平均顆粒大小分別為379000和269000。

（2）含ApoB脂蛋白顆粒的分離：含ApoB脂蛋白顆?？刹捎妹庖哂H和層析法，將VLDL和LDL中的脂蛋白顆粒分為富含膽固醇酯的LpB、LpB：E和富含甘油三酯（TG）的LpB：C，LpB：C：E和LpAⅡ：B：C：D：E等，其中LpB是主要的單脂蛋白，主要存在于LDL2中LpB：C和LpB：C：E是主要的復(fù)脂蛋白，隨著密度的增加，膽固醇和膽固醇脂的含量升高而TG含量降低。

盡管對含ApoA和ApoB脂蛋白顆粒的功能和代謝研究還處在早期發(fā)展階段，但已有許多證據(jù)表明，以載脂蛋白組成分類的脂蛋白顆粒具有功能一致性和代謝均一性，并有特定的致動脈粥樣硬化（AS）作用或抗AS功效。

據(jù)報道，LpAⅠ和LpAⅠ：AⅡ具不同的功能和代謝特征。卵磷脂酯膽固醇?；D(zhuǎn)移酶（LCAT）和膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白（CETP）主要存在于Lpa I而不存在LpAⅠ：AⅡ中。一項對有早發(fā)心肌梗塞家族史的青少年的研究表明，家族史與LpAⅠ有明顯負(fù)相關(guān)，而與LpAⅠ：AⅡ無關(guān)，并認(rèn)為，HDL抗動脈粥樣硬化的功效在LpAⅠ，而不是LpAⅠ：AⅡ。含ApoB的脂蛋白顆粒，若ApoE/ApoC升高，則分解速度快。實驗證明，ApoE含量升高，加快鼠灌注肝臟對富含TG脂蛋白的吸收，而ApoC則降低這一吸收；另外富含TG脂蛋白的降解速度不僅依賴于脂蛋白脂酶（LPL）的含量和活性，還與脂蛋白顆粒中LPL底物的反應(yīng)性有關(guān)，如LpAⅡ：B：C：D：E的脂含量及脂蛋白質(zhì)比與LpB：C和LpB：C：E很相似，而與LPL反應(yīng)的速率常數(shù)比后兩者低得多，水解速度慢，表明載脂蛋白組成對脂蛋白顆粒的分解代謝有重要影響。含ApoB脂蛋白顆粒也有不同的致AS作用，例如家族性高膽固醇血癥（FH）病人的特點是LpB和LpB：E水平升高，LpAⅠ和LpAⅠ：AⅡ無明顯變化；而高TG血癥則伴隨著LpB：C、LpB：c：E和LpAⅡ：B：C：D：E的升高及LpAⅠ和/或LpAⅠ：AⅡ的降低。富含TG的LpB脂蛋白顆粒也具有重要的致AS作用。如Ⅱa型病人LpB水平高。