《動脈粥樣硬化》 二、電泳分類法

根據(jù)脂蛋白的電泳遷移率進(jìn)行分類

血漿脂蛋白是人體脂質(zhì)代謝紊亂的敏感指針，因此在臨床實(shí)踐中，脂蛋白分離分析已成為常規(guī)檢驗(yàn)指標(biāo)。少量血清標(biāo)本可以用電泳方法快速分離出各類脂蛋白，常用的支持介質(zhì)有醋酸纖維素薄膜、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠。

圖2-2 超速離心法與電泳法分離血漿脂蛋白相應(yīng)名稱

醋酸纖維素薄膜電泳：特點(diǎn)是微量、快速、操作簡便、吸附少、分離效果較好，能分離出α、前β、β及乳糜微粒等四條區(qū)帶，有的血清有兩條前β帶。缺點(diǎn)是前β脂蛋白含量過高時(shí)會有拖尾現(xiàn)象，此外染色方法也不夠理想，醋酸纖維素薄膜本身能被脂溶性染料著色，用蘇丹黑B染色后背景深染，油紅O雖然好一些，但脂蛋白帶著色較淺。如用臭氧氧化后，堿性品紅-亞硫酸試劑染色，所得圖形清楚，背景著色較淺，缺點(diǎn)是染色步驟較繁，白蛋白部位有時(shí)染色過深。

瓊脂糖電泳：瓊脂糖是瓊脂的主要成分，瓊脂經(jīng)處理慣除去其中的果膠后即為瓊糖，由于瓊脂糖中的硫酸根含量較瓊脂少，電滲較弱，透明度高，對脂蛋白的分離效果比醋酸纖維素薄膜更好一些，可將血漿脂蛋白分成α、前β、β-脂蛋白和乳糜微粒。若用脂溶性染料染色，背景色淺，如將血清樣品進(jìn)行預(yù)染，可在電泳過程中直接觀察分離效果，區(qū)帶整齊，分辨率高高，重復(fù)性好。液相與固相無明顯分界，電泳速度較快，干膜還可長期保存。缺點(diǎn)是需要臨時(shí)制作凝膠板，不如醋酸纖維素薄膜方便。

聚丙烯酰胺凝膠電泳：兼有電泳和分子篩的雙重作用，分辨率高，電泳時(shí)間短，分離的各脂蛋白帶十分清晰。由于聚丙烯酰胺凝膠具有分子篩的作用，能阻礙顆粒較大的前β-脂蛋白分子移動，所以前β-脂蛋白的區(qū)帶落在脂蛋白的后面。

脂蛋白經(jīng)上述三種電泳分離后，可用分段洗脫染料比色（不適用于圓盤電泳），或用光密度計(jì)掃描定量。以血清球蛋白遷移率作為參照，HDL與α球蛋白遷移在同一位置故稱α-脂蛋白；LDL與β球蛋白遷移在同一位置，稱為β-脂蛋白；VLDL區(qū)帶遷移在β脂蛋白之前故稱前β-脂蛋白；乳糜微粒留在原點(diǎn)樣處不動。電泳技術(shù)是臨床檢驗(yàn)血清蛋白模式的有效手段，因此這種命名法常應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)，如圖2-2所示。