《中國幽門螺桿菌研究》 3Hp檢測方法進展

傳統(tǒng)的Hp診斷方法為胃粘膜活檢組織細菌分離培養(yǎng)、胃粘膜病理組織染色檢菌、胃粘膜尿素酶活性測定，均需經(jīng)胃鏡取材，病人較痛苦，且診斷的敏感性及特異性易受檢驗人員技術(shù)、培養(yǎng)條件等多種因素影響，特別是用于多次隨訪觀察時，不易被病人接受。14C呼吸試驗、13C呼吸試驗和15NH4+排泄試驗是一系列簡單、精確、敏感的非侵入性Hp檢查方法，均為利用Hp具有很高尿素酶活性，可分解15N、13C和14C標記的尿素而產(chǎn)生NH4+和CO2通過測定呼出氣體中14CO2的放射性強度或呼出氣體及尿液中13C和15N的豐度來判斷胃腸道中Hp的存在，特別是13C呼吸試驗和15NH4+排泄試驗均為非放射性檢查方法。這些方法均已用于Hp感染的流行病學(xué)研究，但由于檢查費用較高，并受專用試劑及特殊檢測設(shè)備儀器的限制，國內(nèi)尚較少采用。在以上的多種方法中，無論是侵入性的還是非侵入性的，其可靠程度均受到胃粘膜中Hp的數(shù)量的明顯影響，在普遍接受抗Hp治療（特別是不規(guī)則Hp治療）的國家或地區(qū)，其診斷的準確性明顯降低，這種現(xiàn)象在我國目前的大、中城市應(yīng)引起人們的高度重視。由于感染Hp者機體會產(chǎn)生較高滴度的循環(huán)抗體，特別是IGG類抗體，并可在Hp清除一段時間后滴度明顯下降，ELISA和免疫印跡法已被用于Hp的診斷和流行病學(xué)調(diào)查，但在第一代Hp診斷和流行病學(xué)調(diào)查，但在第一代Hp血清學(xué)方法中應(yīng)用的抗原為Hp全菌、全菌超聲破碎物或全菌酸提取物，其鞭毛蛋白等與空腸彎曲菌等有交叉抗原成分存在，診斷的假陽性率高。由于在第二代Hp血清學(xué)方法中采用了純化的Hp抗原成分，如高分子量蛋白抗原或某一單一抗原成分，提高了Hp血清學(xué)診斷的特異性。從病人分離到的Hp均含有大量的尿素酶蛋白，這種蛋白抗原可引起機體很強的免疫反應(yīng)，尿素酶蛋白抗原的純化及其在流行病學(xué)調(diào)查中應(yīng)用越來越引起人們的重視。血清學(xué)診斷方法由于簡單、經(jīng)濟、敏感性及特異性較高，很適合于Hp的流行病學(xué)研究，特別是用于大面積流行病學(xué)調(diào)查及多次隨訪調(diào)查，其結(jié)果也不易受近期內(nèi)抗生素應(yīng)用的影響。染色體DNA酶切圖譜分析和全菌蛋白電泳分析被用于Hp同源性的檢測，兩種方法均同樣可靠。探針技術(shù)及PCR技術(shù)的應(yīng)用為Hp菌的流行病學(xué)研究提供了強有力的手段，已知Hp尿素酶結(jié)構(gòu)基因作為特異性探針檢測Hp是可行的，并已有根據(jù)編碼種特異性抗原的基因而設(shè)計的探針的應(yīng)用。在PCR技術(shù)中，通過采用某些經(jīng)特別設(shè)計的特異性引物，避免了某些相關(guān)菌的同源序列，提高了PCR的特異性。如使用特異性引物擴增Hp尿素酶A或B基因中的部分基因片段，使標本中Hp檢出的敏感性提高到了10個菌量級，并達到100%的特異性。由于PCR檢測的高度敏感性和特異性，為成功地檢測人類糞便、唾液及環(huán)境中可能存在的Hp提供了一種手段，并將有助于對Hp感染的傳染源及傳播途徑的確證。

總之，Hp的流行病學(xué)研究將成為今后對Hp研究的一個熱點和重點，進一步弄清Hp感染的傳染源、傳播途徑等一系列問題，對有效地在整個人群中控制和預(yù)防Hp感染將有非常重要的意義。隨著各種新技術(shù)新方法的應(yīng)用及大量Hp感染流行病學(xué)的研究的深入開展，將會逐步提示Hp感染流行病學(xué)的本質(zhì)。