《醫(yī)院藥學(xué)》 四、中草藥化學(xué)成分一般鑒別方法

中草藥主要來(lái)源于植物。植物的化學(xué)成分較復(fù)雜，有些成分是植物所共有的，如纖維素、蛋白質(zhì)、油脂、淀粉、糖類(lèi)、色素等。有些成分僅是某些植物所特有的，如生物堿類(lèi)、甙類(lèi)、揮發(fā)油、有機(jī)酸、鞣質(zhì)等。

各類(lèi)化學(xué)成分均具有一定的特性，一般可由藥材的外觀、色、嗅、味等作為初步檢查判斷的手段之一。如藥材樣品折斷后，斷面不油點(diǎn)或擠壓后有油跡者，多含油脂或揮發(fā)油；有粉層的多含淀粉、糖類(lèi)；嗅之有特殊氣味者，大多含有揮發(fā)油、香豆精、內(nèi)酯；有甜奈者多含糖類(lèi)；味若者大多含生物堿、甙類(lèi)、苦味質(zhì)；味酸者含有有機(jī)酸；味澀者多含有鞣質(zhì)等等。

中草藥所含化學(xué)成分均為多類(lèi)的混合物，分析時(shí)常?；ハ喔蓴_，不易得到正確結(jié)果。因此需根據(jù)中草藥所含各種化學(xué)成分的溶解度、酸堿度、極性等理化性質(zhì)，再用各類(lèi)成分的鑒別反應(yīng)加以鑒別。

（一）鑒別注意事項(xiàng)

1．根據(jù)各灰成分不同性質(zhì)，選用適宜的溶劑提取，以保證等成分能被提取出來(lái)。

2．檢品提取液的濃度應(yīng)足以達(dá)到各該反應(yīng)的靈敏度。

3．檢品提取液的酸堿度（pH）值應(yīng)不致影響鑒別反應(yīng)中所需要的pH值。相差甚大時(shí)應(yīng)事先調(diào)節(jié)。

4．提取液較深時(shí)，常易影響觀察鑒別反應(yīng)的效果，此時(shí)可適當(dāng)稀釋?zhuān)蜻M(jìn)一步提純。

5．鑒別反應(yīng)時(shí)應(yīng)注意防止多類(lèi)成分的相互干擾，以免出現(xiàn)假陽(yáng)性，或顏色不正等情況。最好在化學(xué)鑒別的同時(shí)，做空白試驗(yàn)和對(duì)照試驗(yàn)（用已知含某類(lèi)成分的中草藥或純品做陽(yáng)性對(duì)照）。

6．在鑒別試驗(yàn)中，如果某一類(lèi)成分的幾個(gè)鑒別反應(yīng)結(jié)果不一致時(shí)（即有的呈陽(yáng)性反應(yīng)，有的呈陰性）則應(yīng)進(jìn)行全面分析。首先應(yīng)注意呈陽(yáng)性反應(yīng)的試驗(yàn)是否屬于該類(lèi)成分的專(zhuān)一反應(yīng)，否則應(yīng)檢查其他類(lèi)成分能否產(chǎn)生該反應(yīng)，從多方面加以判斷。但也應(yīng)注意，某些反應(yīng)只能對(duì)某一類(lèi)成分中的某個(gè)化學(xué)基團(tuán)呈性反應(yīng)，如檢查黃酮類(lèi)的鹽酸――鎂粉試驗(yàn)，它只對(duì)黃酮類(lèi)中的羥基黃酮類(lèi)（黃酮醇類(lèi)）反應(yīng)明顯，其余類(lèi)的黃酮類(lèi)則不甚明顯，但也不能輕易否定不是黃酮類(lèi)，為了避免孤立和片面的下結(jié)論，一定要全面考慮綜合分析。

中草藥化學(xué)成分一般鑒別試驗(yàn)屯只是一個(gè)初步判斷，最后確證尚需進(jìn)一步提純，以鑒定后才能予以肯定。

（二）鑒別方法

蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸

（1）加熱或礦酸試驗(yàn)：取檢品的水溶液1ml于試管中，加熱至沸或加5％鹽酸，如發(fā)生混濁或有沉淀示含有水溶性蛋白質(zhì)。

（2）縮二脲試驗(yàn)：取檢品的水溶液1ml，加10％氧化鈉溶液2滴，充分搖勻，逐漸加入硫酸銅試液，隨加搖勻，注意觀察，如呈現(xiàn)紫色或紫紅色示可能含有蛋白質(zhì)和氨基酸。

凡蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中含有兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵（－CONH－）者均有此反應(yīng)，能在堿性溶液中與Cu2+生成仙絡(luò)合物，呈現(xiàn)一系列的顏色反應(yīng)，二肽呈藍(lán)色，三肽呈紫色，加肽以上呈紅色，肽鍵越多顏色越紅。

（3）茚三酮試驗(yàn)，取檢品的水溶液1ml，加入茚三酮試液2－3滴，加熱煮沸4－5分鐘，待其冷卻，呈現(xiàn)紅色棕色或藍(lán)紫色（蛋白質(zhì)、胨類(lèi)、肽類(lèi)及氨基酸）。

α氨基酸與茚三酮的水合作物作用，氨其酸氧化成醛、氨和二氧化碳，而茚三酮被還原成仲醇，與所后成的氨及另一分子茚三酮縮合生成有藍(lán)紫色的化合物。

【注】①茚三酮試劑主要是多肽和氨基酸的顯色劑，反應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。試劑溶液pH值以5－7為宜，必要時(shí)可加吡啶數(shù)滴或醋酸鈉調(diào)整。

②此反應(yīng)非常靈敏，但有個(gè)別氨基酸不能呈紫色，而呈黃色，如脯氨酸。

（4）氨基酸薄層層析檢出反應(yīng)：

①吸附劑：硅膠G。

②展開(kāi)劑：（1）正丁醇：水（1：1）（2）正丁醇：醋酸：水（4：1：5）

③顯色劑：0.5％茚三酮丙酮溶液，噴霧后于110烘箱放置5分鐘，顯藍(lán)紫允或紫色。

2．皂甙

（1）泡沫試驗(yàn)：取檢品的水溶液2ml于帶塞試管中，用力振搖3分鐘，即產(chǎn)生持久性蜂窩狀泡沫（維持10分鐘以上），且泡沫量不少于液體體積的1／3。

【注】常用的增溶劑吐溫、司盤(pán)，振搖時(shí)均能產(chǎn)生持久性泡沫，要注意區(qū)別。

（2）溶血試驗(yàn)：取試管4支，分別加入濾液0.25、0.5、0.75 ml，然后依次分別加入生理鹽水2.25、2.0、1.75、1.5ml，使每一個(gè)試管中的溶液都成為2.5ml, 再將各試管加入2％的血細(xì)胞懸液2.5ml，振搖均勻后，同置于37水浴或25－27的室溫中注意觀察溶血情況，一般觀察3小時(shí)即可，或先滴紅細(xì)胞于顯微鏡下，然后滴加檢液看血細(xì)胞是否消失。如有溶血現(xiàn)象示正反應(yīng)。

【注】①鞣質(zhì)對(duì)血紅細(xì)胞有凝集作用，干擾溶血試驗(yàn)的觀察，應(yīng)事先除去（可用取勝酰胺粉吸附或用明膠沉淀）。

②檢液應(yīng)為中性溶液。

（3）醋酐濃硫酸試驗(yàn)（Liebrmann Burchard反應(yīng)）取檢品的水溶液置蒸發(fā)皿中，于水浴上蒸干，殘?jiān)尤肷倭勘姿崾谷芙?，再加入醋酐濃硫酸?9：1）試液，呈現(xiàn)紅紫色并變成污色綠色（甾類(lèi)、三萜類(lèi)成分或皂甙）

（4）區(qū)別甾體皂甙和三萜皂甙：取帶塞試管兩支，各盛檢品的水溶解1 ml，1支加0.1N鹽酸溶液2ml，另一支加0.1N氫氧化鈉溶液2ml用力振搖1分鐘（需左右手交替振搖各半分鐘），觀察兩管泡沫的多少，若兩管泡沫體積相同或酸管多，示含三萜式皂甙；若加堿管泡沫多于加酸管示含甾示含甾體皂甙。

三萜皂甙為酸性皂甙在酸性水溶液中形成較穩(wěn)定的泡沫；甾體皂甙為中性皂甙在堿笥溶液中能形成較穩(wěn)定的泡沫。

3．糖、多糖或甙類(lèi)

（1）堿性酒石酸銅試液：取檢品的水溶液1－2ml（如為醇溶液須將醇蒸發(fā)除去），加入堿笥酒石酸銅試液1ml，于沸水浴上加熱5分鐘，產(chǎn)生棕紅色或磚紅色氧化亞銅沉淀，示有還原糖。

還原糖能使二價(jià)銅鹽（藍(lán)色）還原成氧化亞銅，醛糖的醛基氧化成羧基：

【注】①如檢液呈酸性，應(yīng)先堿化。

②此反應(yīng)所產(chǎn)生的沉淀由于條件不同，其顏色也不同，質(zhì)點(diǎn)上的呈黃色，質(zhì)點(diǎn)大的呈紅色。有保持性膠體存在時(shí)，也常產(chǎn)生黃色沉淀。

③職樣品中含有其他醛、酮及還原較強(qiáng)的其他成分，或中劃藥制劑中附加的抗氧劑、；葡萄糖等均可顯陽(yáng)性反應(yīng)。

（2）α萘酚試驗(yàn)（Molisch紫環(huán)反應(yīng)）：取檢品的水溶液1ml，加5％萘酚試液數(shù)滴振搖后，沿管壁滴入5－6滴濃硫酸，使成兩液層，待2－3分鐘后，兩層液面出現(xiàn)紫紅色環(huán)（糖、多糖或甙類(lèi)）。

多糖類(lèi)遇濃硫酸被水解成單糖，單糖被濃硫酸脫水閉環(huán)，形成糠醛類(lèi)化合物，在濃硫酸存在下與α萘酚發(fā)生酚醛縮合反應(yīng)，生成紫紅色縮合物。

【注】①甙的分子結(jié)構(gòu)中含有糖基，一般屬于單糖類(lèi)，如葡萄糖，鼠李糖、半乳糖，但也有含二分子糖（雙糖）或多分子糖（多糖）。在上述反應(yīng)條件下，甙被水解成單糖，因此甙萘酚試驗(yàn)，系分子中糖部分的反應(yīng)。

②由于此反應(yīng)較為靈敏，如有微量濾紙纖維或中草藥粉末存在于溶液中，都能產(chǎn)生上述反應(yīng)。故濾過(guò)時(shí)應(yīng)加注意。

（3）多糖的確證試驗(yàn)：取檢品的水溶液5ml于水 蒸發(fā)至干，加入1ml蒸餾水，再加入乙醇5ml，如出現(xiàn)沉淀，濾過(guò)收集后用少量熱乙醇洗滌，再將沉淀物溶于3ml蒸餾水中，做下例試驗(yàn)。

①碘試驗(yàn)：取檢品的不溶液1ml，加碘試液1滴，觀察顏色變化，如呈藍(lán)黑色為地衣糖；紫黑色為糊精；藍(lán)色加熱消失，冷后藍(lán)色再現(xiàn)為淀粉。

②多糖水解：取檢品的水溶液1ml，加入稀鹽酸5滴，置沸水浴中加熱10－15分鐘，然后用10％氫氧化鈉液中和至中性，再加新配制的堿性酒石酸銅試淮4滴，另取檢液1ml，不加酸水解直接加入上述試液4滴，兩管同置水浴上煮沸5－6分鐘。如果水解后生成棕紅色常常物的量比未經(jīng)水解的多，則示有多糖。

多糖水解后產(chǎn)生單糖，利用單糖的還原性，使銅離子還原成氧化亞銅。

4．鞣質(zhì)及酚類(lèi)

（1）三氯化鐵試驗(yàn)：取檢品的水溶液1ml，加三氯化鐵試液1－2滴，呈現(xiàn)綠色、污綠色、藍(lán)黑色或暗紫色（可水解鞣質(zhì)顯藍(lán)一藍(lán)黑色，縮合鞣顯綠色一污綠色）。

鞣質(zhì)均是多羥基酚的衍生物，即多元酚，能和三價(jià)鐵離子發(fā)生顏色反應(yīng)生成復(fù)雜的絡(luò)鹽。

【注】此反應(yīng)如遇有礦酸或有機(jī)酸、醋酸鹽等存在，能阻礙顏色的生成。硝基酚類(lèi)對(duì)三氯化鐵試劑無(wú)明顯反應(yīng)。

（2）明膠試驗(yàn)：取檢品的水溶液1ml，加氯化鈉明溶液2－3滴，即生成白色沉淀物。

鞣質(zhì)有凝固蛋白的性能。

（3）溴試驗(yàn)：取檢品的水溶液1ml，加溴試液1－2滴，生成白色或沉淀物，示可能含有酚或兒茶酚鞣質(zhì)。

【注】過(guò)多的溴會(huì)阻礙鞣質(zhì)的沉淀，因此溴水不宜多加。

（4）香草醛一酸試驗(yàn)：取檢品的水溶液點(diǎn)于濾紙片上，干后，噴霧或滴加香草醛一鹽酸試液，呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)（多元酚類(lèi)物質(zhì)）。

（5）鞣質(zhì)、酚類(lèi)薄層層析檢出反應(yīng)：

①吸附劑：聚酰胺；硅膠；硅膠；石膏：水（5：1：7）調(diào)成狀，涂成薄板，105烘干45分鐘。

②展開(kāi)劑：乙醇：醋酸（100：2）；正丁醇：乙酸乙酯：水（5：4：1）；苯：甲醇（95：5）。

③顯色劑：10％三氯化鐵溶液；1％三氯化鐵乙醇溶液與1％鐵氰化鉀水溶液（1：1）顯藍(lán)一紫色斑點(diǎn)。

5．黃酮及其甙類(lèi)

（1）鹽酸一鎂（或鋅）粉試驗(yàn)：取檢品的乙醇溶液1ml，加放少量鎂粉（或鋅粉），然后加濃鹽酸4－5滴，置沸水浴中加熱2－3分鐘，如出現(xiàn)紅色示有游離黃酮類(lèi)或黃酮甙（以同法不加鎂或粉做一對(duì)照，如兩管都顯紅色則有花色素存在。如繼續(xù)加碳酸試液使成堿笥即變成紫色雙轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色，即證明含花色素）。

黃酮類(lèi)的乙醇溶液，在鹽酸存在的情況下，能被鎂粉還原，生成花色甙元而呈現(xiàn)紅色或紫色反應(yīng)（個(gè)別為淡黃色、橙色、紫色或藍(lán)色）。這是由于酮類(lèi)化合物分子中含有一個(gè)堿性氧原子，致能溶于稀酸中被還原成帶四價(jià)的氧原子即鋅鹽。本法是鑒別黃酮類(lèi)的一個(gè)反應(yīng)。但花色素本身在酸性下（不需加鎂粉）呈紅色，應(yīng)加以區(qū)別。

【注】①此反慶僅在化學(xué)結(jié)構(gòu)中，第三位上帶羥基的酮醇類(lèi)顯色較明顯，而其它黃酮烷酮類(lèi)均不甚明顯。因此試驗(yàn)呈陰性反慶是不能做出否定的結(jié)論，尚需結(jié)合其他實(shí)驗(yàn)再做結(jié)論。

②試驗(yàn)應(yīng)在醇中進(jìn)行，水分多會(huì)影響顏色的生成。此反慶較慢，有時(shí)需置水浴上加熱，以促使反應(yīng)的進(jìn)行。

（2）熒光試驗(yàn)：

①三氯化鋁試驗(yàn)：取檢品的乙醇溶液點(diǎn)于濾紙片上（干后再點(diǎn)1次，使其濃度庥中），干后，噴霧1％三氯化鋁乙醇試液，在紫外光燈下觀察，呈現(xiàn)黃色、綠色、橙色等熒光為黃酮類(lèi)；呈現(xiàn)天藍(lán)色或黃綠色；熒光，則為二氫黃酮類(lèi)。這是區(qū)別二氫黃酮類(lèi)化合物的一種鑒別反應(yīng)。

②硼酸丙酮枸櫞酸丙酮試驗(yàn)：取檢品的乙醇溶液1ml，在沸水浴上蒸干加入飽和硼酸丙酮溶液及10％枸櫞酸丙酮溶液各0.5ml，蒸去丙酮后，在紫外光燈下觀察，管內(nèi)呈現(xiàn)強(qiáng)烈的綠色熒光（黃酮或其甙類(lèi)）。

（3）堿液試驗(yàn)：取檢品的乙醇溶液點(diǎn)于濾紙片上（干后，再點(diǎn)一次，使其溶液集中），干后，噴1％碳酸鈉溶液或在氨蒸氣中熏幾分鐘，呈現(xiàn)亮黃、綠或橙黃色。如將氨氣熏過(guò)的濾紙露置空氣中，顏色逐漸裉去而變?yōu)樵械念伾S酮或其甙類(lèi)）。

試劑一NH3AICI3Na2CO3光線ViS.U.VViS.U.VViS.U.VViS.U.V化合物黃酮淡黃暗棕、紅棕、黃棕黃亮黃淡黃亮黃黃酮醇淡黃亮黃、黃綠、棕黃亮黃、黃綠、綠黃黃、黃棕、暗藍(lán)異黃酮無(wú)色淡黃、紫無(wú)色淡黃、紫無(wú)色淡綠兒茶精無(wú)色無(wú)色無(wú)色淡藍(lán)黑無(wú)色二氫黃酮無(wú)色無(wú)色**無(wú)色無(wú)色、淡黃、淡綠無(wú)色淡黃、綠花色甙紅、橙紫深紅、橙紫、淡棕藍(lán)暗藍(lán)查耳酮黃棕、黑、黃棕黃、橙、紅橙、紅、紫黑黃、橙橙*、棕、紅橙、藍(lán)紅

*示有熒光＊＊示在短波紫外線光下為黑色ViS.系可風(fēng)光U.V系紫外光

6．蒽醌及其甙類(lèi) 取檢品的乙醇溶液10ml，蒸去乙醇，殘?jiān)?％氫氧化鈉溶液2－3ml，在沸水中加15分鐘，冷后濾過(guò)，濾液加稀鹽酸酸化，加乙醚提取，取乙醚提取液做下列檢查：

（1）堿液試驗(yàn)：取上述乙醚溶液，加等量1％氫氧化鈉溶液，搖勻，水層呈現(xiàn)紅色，加入少許3％過(guò)氧化氫溶液，在沸水浴中加熱4分鐘，紅色不裉，當(dāng)加酸酸化后，紅色消失。加堿堿化后紅色又出現(xiàn)（蒽醌類(lèi)化合物反應(yīng)）。

1，8一二羥基蒽醌的酚羥基遇氫氧化鈉生成鈉鹽，而呈現(xiàn)紅色，遇酸顯黃色。

【注】蒽醌和二蒽酮與堿液不顯紅色，只呈黃色，但以氧化羥基蒽醌后遇堿即顯紅色。

（2）醋酸鎂試驗(yàn)：取上述醚溶液1ml，蒸去乙醚，殘?jiān)尤胍掖?ml溶解，加入1％醋酸鎂甲醇溶液3滴，顯紅色（如顯橙黃色可能為二氫蒽醌）。

羥基蒽醌類(lèi)與醋酸鎂甲醇溶液反應(yīng)可顯橙、紅、藍(lán)、紫等色，產(chǎn)生這些顏色的必要投機(jī)倒把至少有一個(gè)α位羥基。加羥基的位置不同，產(chǎn)生的顏色也不同。一般在同一苯環(huán)上有兩個(gè)α羥基者顯紫紅色或藍(lán)色；如同一苯環(huán)在有兩個(gè)鄰位的羥基，一個(gè)α位，一個(gè)β位，顯紫色或紫鍇。其他α羥基蒽醌一般呈橙至紅色。因此這一顏色反應(yīng)僅可作蒽醌的檢只識(shí)用，而且還可初步判斷羥的基的位置。

【注】醋酸鎂試驗(yàn)亦可用濾紙斑點(diǎn)顯色法進(jìn)行。

（3）蒽醌薄微量檢出反應(yīng)：

①吸附劑：硅膠；中性氧化鋁（Ⅲ級(jí)）；硅膠G濕法制板。

②展開(kāi)劑：苯：醋酸（6：3）石油醚：丙酮：水（5：3：3：5）；苯甲酸酯：甲酸（74：24：1）。

③顯色劑；5％氫氧化鈉液（顯紅色）；1％醋酸鎂甲醇溶液（顯黃色）。

此外亦可在紫外燈光下觀察熒光。

7．強(qiáng)心甙

（1）3，5一二硝基苯甲酸試驗(yàn)（Kedde’s反應(yīng)）：取檢品的乙醇溶液2ml，加3，5一一硝基苯甲酸試液3－4滴再加10％氫氧化鈉溶液2滴，呈現(xiàn)紅色或紫紅色（9為α、β不飽和內(nèi)酯環(huán)強(qiáng)心甙的反應(yīng)）。

（2）堿性苦味酸試驗(yàn)：取檢品的醇溶液1ml，顯橙色或橙紅色（此反應(yīng)常在15分鐘后，顯色最明顯）。

（3）亞硝酰鐵氰化鈉試驗(yàn)（Legal反應(yīng)）：取檢品的醇溶液1ml，蒸去溶劑，放冷后，加吡啶少許使殘?jiān)芙?，?.5%亞鐵試液4－6滴，搖勻，再加入10％氫氧化鈉1－2滴，即顯紅色并逐漸消失（為檢查強(qiáng)心甙元的反應(yīng)）。

（4）三氯化鐵水醋酸試驗(yàn)（Keller反應(yīng)）：取檢品的乙醇溶液2ml，蒸去溶劑，殘?jiān)?.5%三氯化鐵冰醋酸溶液1ml，使溶解后，沿試管壁加入濃硫酸1ml，在兩液界面顯紅棕色環(huán)，繼則變?yōu)闇\綠、藍(lán)色，而冰醋酸層顯藍(lán)色，示含α去氧糖強(qiáng)心甙。

（5）醋酐一濃硫本試驗(yàn)（Liebirman Barchard 反應(yīng)）：取檢品的乙醇溶液2 ml，置蒸發(fā)皿中，于水浴上蒸干，殘?jiān)颖姿?ml使溶解，再加入醋酐一濃硫酸（19：1）數(shù)滴，呈現(xiàn)黃→紅→藍(lán)→紫→污綠色，并逐漸裉色。因顏色變化很快，須注意觀察（為檢查強(qiáng)心甙分子結(jié)構(gòu)中甾體母核的反應(yīng)）。

【注】①試驗(yàn)1，2，3，的反應(yīng)，均系在較強(qiáng)的堿性條件下進(jìn)行，當(dāng)有蒽醌存在時(shí)，須先將檢液置水浴上蒸去乙醇，再加乙醚適量，用1％氫氧化鈉溶液反復(fù)萃除蒽醌（棄去紅色堿液），然后將乙醚溶液于水浴上蒸去乙醚，殘?jiān)儆靡掖既芙夂螅┰囼?yàn)用，以免干擾。

②試驗(yàn)4的反應(yīng)僅對(duì)游離的去氧糖和結(jié)合的甙呈正反應(yīng)。但當(dāng)α去氧糖與葡萄糖等其他糖結(jié)合的多，如不水解則為負(fù)反應(yīng)。

③上述鑒別反應(yīng)均呈陽(yáng)性,可判斷為強(qiáng)心甙。

8．內(nèi)酯、香豆精及其甙類(lèi)：取檢品的乙醇溶液10m1，加5％鹽酸溶液10，在沸水浴中熱15－20分鐘，冷后，加苯提取將苯提取液于水浴上蒸干（避火），殘?jiān)舆m量乙醇溶解后，供做下列檢查：

（1）異羥肟酸鐵試驗(yàn)：取上檢液2ml，加鹽酸羥試液2滴，10％氫氧化鉀的甲醇溶液2滴，在水浴上微熱，冷卻，用稀鹽酸酸化，加入15三氯化鐵試劑液1－2滴，顯紫色苛橙紅色。

內(nèi)酯及香豆素類(lèi)在堿性條件下，與羥反應(yīng)生成異羥肟酸，與鐵鹽絡(luò)合而顯色。

（2）內(nèi)酯試驗(yàn)：取上檢液2ml，加1％氫氯化鈉溶液2m1，在沸水浴中加熱3－5分鐘，如溶液較前澄明，加酸酸化后又變混濁為正反應(yīng)。

內(nèi)酯化合物在熱堿溶液中，開(kāi)環(huán)成鹽而溶于水，酸化則重新閉環(huán)，而出內(nèi)酯化合物，溶液即變混濁。

（3）重氮化反應(yīng)：取上檢液1ml，加等體積3％碳酸鈉溶液，在沸水浴中加熱3－4分鐘，冷后，加入新配制的重氮化試劑1－2滴，即顯紅色。

（4）熒光反應(yīng)：取上檢液點(diǎn)于濾紙上（干后，再點(diǎn)1次，以集中濃度），在紫外光燈下觀察，如為羥基香豆精應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色熒光，熏氨蒸氣后變?yōu)辄S綠色熒光。呋喃香豆精應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色或黃棕色的熒光。

9．樹(shù)脂類(lèi) 取檢品的乙醇溶液1ml，加1－2％氫氧化鈉溶液2－3ml，顯渾濁或沉淀，在水浴上加3－5分鐘，溶液變清或沉淀減少，加酸酸化則又渾濁或沉淀，示含有酸性樹(shù)脂。如在上項(xiàng)反太中，當(dāng)加堿加熱后，溶液仍渾濁示含有中性樹(shù)脂。

因酸性樹(shù)脂能溶于堿液中，加熱后就成澄明液。中性樹(shù)脂則不溶于堿性溶液中，故溶液仍顯渾濁。

10．生物堿 取檢品的酸性乙醇溶液20ml，調(diào)節(jié)pH值至6－7，蒸發(fā)除去乙醇，殘?jiān)?％鹽酸溶液4－5ml溶解，濾過(guò)，濾液供下列檢查：

（1）碘化鉍鉀試液1ml，加碘化鉍鉀試液1－2滴，生成黃色或橘紅色沉淀。

AIK＋BiI3·KI→AIK·BiI3·KI↓

（生物堿）（碘化鉍鉀）（桔紅色）

（2）碘化汞試驗(yàn)：取濾液1ml加碘化汞鉀試液1－2滴，生成白色淡黃色沉淀物。

AIK＋KI·HgI2→AIK·KI·HgI2↓

若在過(guò)量的試劑中其沉淀又復(fù)溶解。

（3）碘一碘化鉀試驗(yàn)：取濾液ml，加碘化一碘化鉀試液1－2滴，出現(xiàn)棕色沉淀或混濁。

（4）硅鎢酸試驗(yàn)：取濾液1m1，加硅鎢酸試液1－2滴，生成灰白色或淡黃色沉淀。加熱可使反應(yīng)靈敏。

（5）生物堿呈色反應(yīng)：

生物堿名稱(chēng)呈色反應(yīng)生物堿名稱(chēng)呈色反應(yīng)甲醛硫酸試液鉬酸銨一硫酸試液?jiǎn)岱?br />阿撲嗎啡
可待因
狄?jiàn)W寧
罌粟堿
馬錢(qián)子堿紫→深紫
紫堇→藍(lán)
紫藍(lán)→藍(lán)
紫堇→藍(lán)
深紅→棕
紅橙紫→棕綠
紫堇→綠
綠→藍(lán)
綠→藍(lán)
紫堇→綠
紅紫秋水仙堿
毒扁豆堿
阿托品
麻黃素
烏頭堿
那可汀紫堇→橙
橙
橙
茶
一
紫→褐綠
一
一
一
黃
綠→紅黃

11．有機(jī)酸

（1）溴酚藍(lán)試驗(yàn)：取檢品的酸性乙醇溶液點(diǎn)于濾紙，干后，噴霧0.1％溴酚藍(lán)乙醇溶液（70％乙醇），立即在藍(lán)色背景中顯黃色斑點(diǎn)。如不明顯，可噴霧氨水，然后暴露在鹽酸氣體中，背景逐漸由藍(lán)色變?yōu)辄S色，而有機(jī)酸的斑點(diǎn)仍然為藍(lán)色。

（2）酸堿度試驗(yàn)：取檢品液（水提取液）以pH試紙檢查，如試紙顏色指示pH在7以下，可能含有有機(jī)酸。

（3）紙層析檢出試驗(yàn)：見(jiàn)紙層析操作方法。

①支持劑：新華濾紙（中速）

②展開(kāi)劑：正丁醇：醋酸：水（4：1：5）。

③顯色劑：0.15溴酚藍(lán)乙醇溶液（70％乙醇）。

結(jié)果：呈現(xiàn)藍(lán)色斑點(diǎn)。

12．揮發(fā)漬及油脂

（1）取檢品的乙醚溶液，置蒸發(fā)皿中，待溶劑揮發(fā)生，殘?jiān)鼮橛蜖钗?，并有香氣或特異自氣，加熱，油狀物減少或消失示含揮發(fā)油。如無(wú)香氣，或加狀物不減少，可能為油脂，可于殘?jiān)屑尤肷僭S無(wú)水硫酸鈉顆粒，直火加熱，如產(chǎn)生氣泡，并有剌激性特臭的濃白色氣體（丙烯醛），示含油脂類(lèi)化合物。

（2）取檢品的乙醚溶液，點(diǎn)在濾紙上，待溶劑揮發(fā)生，噴霧0.05%熒光素鈉溶液，再將濾紙下置碘蒸氣上，熏幾分鐘，產(chǎn)生黃或黃綠色斑點(diǎn)，背景為粉紅色示含揮發(fā)油。

（3）取檢品的乙醇溶液，置白瓷皿中，待溶劑揮發(fā)生，殘?jiān)屑?％香草醛鹽酸液，顯黃色、紅、棕、藍(lán)、紫等顏色，示含揮發(fā)油。

（4）揮發(fā)油薄層微量檢出反應(yīng)：

①吸附劑：硅膠G（濕法制板）；中性氧化鋁：石膏：水（5：1：7）。

②展開(kāi)劑：正已烷：乙酸乙酯（85：15）；石油醚：乙酸乙酯（85：15）。

③顯色劑：含5％香草醛的濃硫酸液（臨用新配）105烘2－10分鐘；熒光照射；濃硫酸。

【注】香草醛化學(xué)名為3甲氧基4羥基苯甲醛。