《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》 三、微生物學(xué)診斷

檢測(cè)HIV感染者體液中病毒抗原和抗體的方法，操作方便，易于普及應(yīng)用，其中抗體檢測(cè)尤普通。但HIv P24抗原和病毒基因的測(cè)定，在HIV感染檢測(cè)中的地位和重要性也日益受到重視。

（一）抗體檢測(cè)

主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）和免疫熒光試驗(yàn)（IFA）。ELISA用去污劑裂解HIV或感染細(xì)胞液提取物作抗原，IFA用感染細(xì)胞涂片作抗原進(jìn)行抗體檢測(cè)，如果發(fā)現(xiàn)陽性標(biāo)本應(yīng)重復(fù)一次。為防止假陽性，可做Westernblot （WB，蛋白印跡法）進(jìn)一步確證。

WB法是用聚丙烯酰胺凝膠電泳將HIV蛋白進(jìn)行分離，再經(jīng)傳移電泳將不同蛋白條帶轉(zhuǎn)移于硝酸纖維膜上，加入病人血清孵育后，用抗人球蛋白酶標(biāo)抗體染色，就能測(cè)出針對(duì)不同結(jié)構(gòu)蛋白抗體，如抗gp120、gp41、P24抗體，特異性較高。

(二)抗原檢測(cè)

用ELISA檢測(cè)P24抗原,在HIV感染早期尚未出現(xiàn)抗體時(shí),血中就有該抗原存在.由于P24量太少,陽性率通常較低?，F(xiàn)有用解離免疫復(fù)合物法或濃縮P24抗原，來提高敏感性。

（三）核酸檢測(cè)

用PCR法檢測(cè)HIV基因，具有快速、高效、敏感和特異等優(yōu)點(diǎn)，目前該法已被應(yīng)用于HIV感染早期診斷及艾滋病的研究中。

（四）病毒分離

常用方法為共培養(yǎng)法，即用正常人外周血液分離單個(gè)核細(xì)胞，加PHA刺激并培養(yǎng)后，加入病人單個(gè)核細(xì)胞診斷及艾滋病的研究中。