水飛薊素藥理研究進(jìn)展

在眾多的抗自由基天然產(chǎn)物中，水飛薊素（silymarin）為少數(shù)幾個(gè)在臨床上廣泛使用的藥物之一，而且經(jīng)過(guò)近30年的臨床檢驗(yàn)，證明該藥的確切療效和極低的毒性。近年來(lái)對(duì)該藥的研究較為活躍，歸納該藥的主要作用特點(diǎn)有以下幾點(diǎn)：

1抗自由基活性

水飛薊素對(duì)于由CCl4、半乳糖胺、醇類(lèi)和其它肝毒素（如Amanitaphalleodes）造成肝損害有保護(hù)作用。1990年Lotteron等人報(bào)道了在小鼠肝微粒體內(nèi)，水飛薊素能減少由CCl4

代謝物引起的體外脂質(zhì)過(guò)氧化及由還原型輔酶Ⅱ（NADPH）單獨(dú)引起的過(guò)氧化作用，這些都表明水飛薊素為鏈中斷抗氧化劑或?yàn)樽杂苫宄齽?。Carlos等人用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定水飛薊賓（silybin）和水飛薊素體外抗超氧陰離子O2-、羥基自由基、烷氧基自由基的作用。水飛薊素和水飛薊賓能抑制H2-O2-luminol產(chǎn)生的化學(xué)發(fā)光。采用此種方法可以判斷物質(zhì)的抗氧化能力。與（＋）兒茶素（carechin）和VitE相比，抑制此體系化學(xué)發(fā)生50％時(shí)，水飛薊素的濃度為0.30μg／mL，水飛薊賓為0.75μg／mL，兒茶素為25ng／mL，VitE為30μg／mL。水飛薊素和水飛薊賓抑制luminol-過(guò)氧化酶產(chǎn)生的化學(xué)發(fā)光，則表示其抗超氧陰離子的作用。與SOD比較，抑制化學(xué)發(fā)光50％時(shí)，SOD的濃度為3.2ng/mL、水飛薊素為0.8μg/mL、水飛薊賓為5.5μg／mL，說(shuō)明水飛薊素和水飛薊賓抗超氧陰離子作用較弱。采用特丁基氫過(guò)氧化物與亞鐵離子的化學(xué)發(fā)光法，來(lái)判定水飛薊賓和水飛薊素對(duì)烷氧基自由基的作用。抑制化學(xué)發(fā)光50％時(shí)，水飛薊素濃度為1.6μg／mL、水飛薊賓為2.8μg／mL、VitE為2.5μg/mL。這個(gè)結(jié)果表明水飛薊素和水飛薊賓對(duì)烷氧基自由基有非常強(qiáng)的清除作用。H2O2被催化能生成氧氣（O2），通過(guò)測(cè)定生成O2的量，可以間接判定H2O2對(duì)物質(zhì)的氧化作用，但無(wú)論是SOD還是水飛薊賓二琥珀酸酯二鈉鹽（SDH）都不能改變O2的生成速度，表明他們兩者都無(wú)清除H2O2的作用。采用脫氧核糖法測(cè)定SDH對(duì)羥基自由基的清除作用，其結(jié)果表明SDH不象其它黃酮類(lèi)抗氧劑，如槲皮素和myricetin，SDH在含有Fe3+-EDTA和H2O2的體系中不刺激·OH的生成，而且無(wú)論是否存在EDTA，均能抑制脫氧核糖的降解。SDH在無(wú)EDTA存在時(shí)也能抑制脫氧核糖降解，說(shuō)明它具有一定金屬離子絡(luò)合能力，但這種作用并不與其濃度成正比，只能說(shuō)明絡(luò)合能力較弱。而且實(shí)驗(yàn)表明SDH能與·OH迅速結(jié)合，其反應(yīng)速度常數(shù)為K=（1.0～1.2）×1010／ms。

2抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用

水飛薊素和水飛薊賓為抗氧自由基活性物質(zhì)。其抗脂質(zhì)過(guò)氧化的作用已經(jīng)被實(shí)驗(yàn)證實(shí)。Philippe等人報(bào)道水飛薊素對(duì)由CCl4誘導(dǎo)所致脂質(zhì)過(guò)氧化的保護(hù)作用，并討論了作用機(jī)制，指出水飛薊素具有防止CCl4誘導(dǎo)的脂質(zhì)過(guò)氧化作用，即水飛薊素減少CCl4的代謝激活生成的自由基和對(duì)這些自由基有清除作用。

水飛薊賓或水飛薊素能使CCl4對(duì)脂質(zhì)的共價(jià)結(jié)合明顯減少。CCl4所致的脂質(zhì)過(guò)氧化被水飛薊素和水飛薊賓分別減少72％和32％。Valenguela等人報(bào)道SDH對(duì)由NADPH-Fe2+-ADP和特丁基氫過(guò)氧化物誘發(fā)微粒體脂過(guò)氧化抑制作用。評(píng)價(jià)脂質(zhì)過(guò)氧化的方法為測(cè)定生成的丙二醛和化學(xué)發(fā)光。結(jié)果表明水飛薊素對(duì)·OH的清除作用強(qiáng)于對(duì)丁氧基自由基的清除作用?！H自由基可攻擊脂肪酸、蛋白質(zhì)核酸，導(dǎo)致組織損傷。在所有活性氧自由基中，·OH引起的損害最大。Bindoli等人研究了水飛薊素在線(xiàn)粒體和微粒體中抗Fe2+-抗壞血酸或NADPH-Fe2+-ADA誘發(fā)的脂質(zhì)過(guò)氧化作用。通過(guò)O2攝入量、丙二醛生成和線(xiàn)粒體膨脹來(lái)確定水飛薊素的抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用。在其實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)水飛薊素先于Fe2+-抗壞血酸加入線(xiàn)粒體時(shí)，其濃度為3μmol/L即可產(chǎn)生抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用，而在20μmol／L時(shí)則完全抑制由Fe2+-抗壞血酸引發(fā)的脂質(zhì)過(guò)氧化作用。反之將Fe2+-抗壞血酸先于水飛薊素加入線(xiàn)粒體中時(shí)，水飛薊素在80μmol／L時(shí)，完全抑制Fe2+-抗壞血酸誘發(fā)的脂質(zhì)過(guò)氧化。水飛薊素抗由Fe2+-抗壞血酸誘發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化作用?？梢詮腛2攝入量和丙二醛的生成量中觀察到，水飛薊素在25μmol／L時(shí)，可完全抑制脂質(zhì)過(guò)氧化發(fā)生，并且在等摩爾濃度時(shí)，水飛薊素在線(xiàn)粒體中抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用為α-生育酚的10倍。在肝微粒體內(nèi)，水飛薊素能抑制由NADPH-Fe2+-ADP誘導(dǎo)的脂質(zhì)過(guò)氧化。其濃度與在線(xiàn)粒體內(nèi)抑制脂質(zhì)過(guò)氧化的濃度大致相同。Valenguela等人研究了水飛薊素對(duì)由乙醇誘導(dǎo)的肝脂質(zhì)過(guò)氧化的抑制作用，當(dāng)口服乙醇時(shí)，由于乙醇被細(xì)胞色素P45201E1氧化代謝，生成烷氧基自由基，它使肝脂質(zhì)過(guò)氧化，產(chǎn)生丙二醛和促使化學(xué)發(fā)光加強(qiáng)。同時(shí)，也使肝中的谷胱甘肽（GSH）減少了36％，氧化型谷胱甘肽（GSSG）增加128％，GSH／GSSG比值減少。然而預(yù)先給予水飛薊素時(shí)，當(dāng)單獨(dú)給乙醇時(shí)，丙二醛的生成和化學(xué)發(fā)光加強(qiáng)受到完全抑制。這表示由乙醇引起的肝脂質(zhì)過(guò)氧化受到抑制。水飛薊自己本身能作為自由基清除劑，特別是對(duì)由細(xì)胞色素P45201E1代謝激活所生成的乙氧基自由基有較強(qiáng)的清除作用。通過(guò)滅活這些自由基，水飛薊素阻礙這些自由基與不飽和脂肪酸的作用。水飛薊素能使肝中總GSH增加32％。我國(guó)學(xué)者芮耀誠(chéng)等人研究了水飛薊賓對(duì)缺血-再灌注腦產(chǎn)生氧自由基、脂質(zhì)過(guò)氧化物及白三烯（LT）的影響。以腦缺血沙土鼠為模型，將SOD和丙二醛作為指標(biāo)，觀察藥物對(duì)氧自由基、LT及脂質(zhì)過(guò)氧化的作用。腦缺血-再灌注損傷引起腦組織中SOD和MDA含量的顯著變化，SOD值降低、MDA升高，ip水飛薊賓100，200，400mg／kg，使沙土鼠腦缺血損傷后的SOD含量顯著升高，MDA顯著降低。腦缺血30min，再灌注30min后，LT含量顯著升高，水飛薊賓（200mg／kg）能顯著降低缺血-再灌注引起的LT升高。Antonello等人給小鼠服高鐵飲食并服用水飛薊賓100mg（kg·d），4個(gè)月后測(cè)定其脂質(zhì)過(guò)氧化，其結(jié)果表明肝的GSH水平增高，特別是GSSG水平也增高，這雖然與常規(guī)細(xì)胞氧化應(yīng)激時(shí)，GSH減少相矛盾，但是高水平的GSSG反映了由GSH過(guò)氧酶代謝脂質(zhì)氫過(guò)氧化，而使GSH氧化加劇。實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明，使用水飛薊賓能防止脂質(zhì)過(guò)氧化和肝GSH增加。而且還說(shuō)明水飛薊素也為鐵離子絡(luò)合劑，即水飛薊賓通過(guò)雙重作用減少鐵離子超載所致的毒性。

3抗脂氧酶作用

Dgle等人發(fā)現(xiàn)脂氧酶抑制劑對(duì)冷束縛應(yīng)激所成的胃潰瘍有較強(qiáng)的抑制作用。并指出其潰瘍生成涉及LT。而水飛薊素在其實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭?，顯示具有較好脂氧酶抑制作用。其抗?jié)冏饔脙?yōu)于雷尼替丁，潰瘍指數(shù)（ulcerindex）為（0.58士0.34）％。Fiebrich等在體外實(shí)驗(yàn)也證明水飛薊素為脂氧酶抑制劑和前列腺素合成酶抑制劑。Pueria等人研究水飛薊素在各種炎癥模型上和白細(xì)胞遷移的藥理作用，表明水飛薊素對(duì)由角叉菜膠引起急性炎癥的抑制作用，其ED50為62.42mg／kg。水飛薊素對(duì)由甲苯引起的小鼠耳水腫型作用，依據(jù)臨床給藥不同而產(chǎn)生不同藥效。局部給藥時(shí)的抑制率為44.52％，而吲哚美辛為35.96％，而經(jīng)腹腔內(nèi)給藥作用較低，說(shuō)明其生物利用度較低。水飛薊素在高劑量時(shí)能抑制由角叉菜膠所致的白細(xì)胞浸潤(rùn)，ED50為73.34mg／kg，而且中性白細(xì)胞遷移也明顯減少。這表明水飛薊素在體內(nèi)有較強(qiáng)的抗炎作用，正是由于水飛薊素的抗自由基作用，使其能抑制環(huán)氧酶和脂氧酶，并預(yù)示水飛薊素除保肝作用外，還可作為抗炎藥物使用。我國(guó)學(xué)者林愛(ài)友等人認(rèn)為腦組織和腦血管含有豐富的脂氧酶，具有合成LT的能力，腦缺血時(shí)LT釋放增加。以槲皮素為對(duì)照，研究了水飛薊賓對(duì)培養(yǎng)豬腦基底動(dòng)脈合成及釋放LT的影響。其研究結(jié)果表明水飛薊賓同槲皮素一樣，具有抑制腦血管內(nèi)5-脂氧酶合成和釋放LT的作用，這揭示水飛薊賓對(duì)腦缺血具有保護(hù)作用。

4抗GSH徘空作用

GSH被認(rèn)為是對(duì)抗化學(xué)誘導(dǎo)細(xì)胞毒最重要的生物分子。GSH能參與活性異生物質(zhì)的清除、氫過(guò)氧化物的還原或直接清除自由基。GSH在異生物質(zhì)誘導(dǎo)肝損傷中的保護(hù)作用已經(jīng)為實(shí)驗(yàn)所證實(shí)。水飛薊素和SDH具有對(duì)異生物質(zhì)，包括毒傘素（phalloidin）、鵝膏蕈堿（α-amanitin）、鐠（praseodymium）、CCl4、乙硫酰胺（ethione）引起肝毒性具有保護(hù)作用。水飛薊素不同于其它抗氧化的黃酮類(lèi)似物，它可以增加肝和其它組織中GSH水平。已發(fā)現(xiàn)服用水飛薊素后，在肝、腸、胃等消化器官中，GSH增加，說(shuō)明水飛薊素能增加氨基酸的內(nèi)臟通透性，這使GSH合成增加，并且抑制由膽汁釋放GSH。在非消化器如肺、脾、腎等器官，水飛薊素不能影響其水平變化，在腎中其GSH水平稍有降低，這說(shuō)明腎在體內(nèi)是一個(gè)血漿GSH降解的主要部位。水飛薊素使GSH在消化器官內(nèi)增加，可以保護(hù)上述組織免受異生物質(zhì)的損害，起到解毒作用。有報(bào)道使用SDH可以使服用過(guò)量乙酰胺苯酚小鼠肝中GSH增加，并且消除其藥害作用。

5抗腫瘤作用

各種活性氧能氧化鳥(niǎo)嘌呤形成8-羥基鳥(niǎo)嘌呤，造成DNA損傷，進(jìn)而引起腫瘤，應(yīng)用抗氧化劑，特別是自由基清除劑可以防止這一過(guò)程的發(fā)生。水飛薊素作為一個(gè)有效的抗自由基物質(zhì)也顯示了預(yù)防和治療惡性腫瘤的作用。近兩年來(lái)對(duì)水飛薊素的抗腫瘤作用研究得特別活躍。Ahmad等人研究了水飛薊素對(duì)引起小鼠皮膚腫瘤增長(zhǎng)的若干個(gè)皮膚腫瘤起動(dòng)因子（EGFR）的防護(hù)作用，實(shí)驗(yàn)證明這些皮膚腫瘤增長(zhǎng)因子的作用完全可以被水飛薊素抑制。在其研究中，使用含有EGFR表達(dá)的表皮腫瘤細(xì)胞A431，評(píng)價(jià)水飛薊素抗皮膚腫瘤的增長(zhǎng)作用和由于激活EGFR導(dǎo)致細(xì)胞循環(huán)過(guò)程紊亂。用水飛薊素處理過(guò)的細(xì)胞，完全抑制了配基誘導(dǎo)EGFR激活，并且不影響蛋白質(zhì)水平。使用水飛薊素也可導(dǎo)致酪氨酸磷酸化，在水飛薊素抑制EGFR激活過(guò)伴有EGFR內(nèi)激酶活性受到抑制，用水飛薊素處理細(xì)胞顯示了對(duì)DNA合成及細(xì)胞增長(zhǎng)的抑制。上述結(jié)果表示水飛薊素對(duì)皮膚病的化學(xué)防護(hù)作用是由EGFR信息修補(bǔ)體系調(diào)節(jié)所致。由于表皮生長(zhǎng)因子受體和其家族的表皮生長(zhǎng)因子在前列腺癌中起重要作用，因此，抑制表皮生長(zhǎng)因子就成為一種防治前列腺癌的研究方向。Zi等人證明水飛薊素能抑制人前列腺癌Dul45細(xì)胞的增長(zhǎng)。用人乳腺腫瘤細(xì)胞MDA-MB468測(cè)定了水飛薊素的活性，結(jié)果顯示出極大的抑制作用。Zi等人還報(bào)道了水飛薊素對(duì)12-O-四癸?；鸩ù?13-酸酯（TDA）和oradaicacid（OA）引起小鼠皮膚腫瘤有抑制作用，預(yù)先以水飛薊素處理小鼠皮膚然后加入TPA或OA，則其誘發(fā)腫瘤作用被抑制，同時(shí)由TPA和OA引起的腫瘤壞死因子（TNFα）的RNA在小鼠皮膚上表達(dá)也被完全抑制。巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的TNFα在肝臟類(lèi)癥損傷中起非重要的作用，如重癥肝炎和慢性肝炎等病人體內(nèi)產(chǎn)生TNFα的能力均高于正常人，肝臟表面存在大量的TNFα受體，在脂多糖（LPS）所致的肝損傷中，TNFα是一個(gè)關(guān)鍵性介質(zhì)。我國(guó)學(xué)者張俊年等人也研究了水飛薊賓對(duì)肝臟類(lèi)癥損傷、TNF產(chǎn)生及其生物活性的影響。結(jié)果表明：水飛薊賓在體內(nèi)外均可顯著抑制LPS誘導(dǎo)TNF產(chǎn)生，在體外能抑制TNF對(duì)肝細(xì)胞因子GSG-7701和成纖維細(xì)胞系L929的細(xì)胞毒作用：在體內(nèi)對(duì)LPS誘導(dǎo)的痤瘡丙酸桿菌致敏的小鼠肝臟類(lèi)癥損傷有保護(hù)作用。這表明水飛薊素的保肝作用機(jī)制可能與其抑制TNF的產(chǎn)生和活性有關(guān)。

6降血脂作用

動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis）是心、腦血管病的重要病理基礎(chǔ)，血漿脂質(zhì)代謝紊亂是動(dòng)脈粥樣硬化形成的重要危險(xiǎn)因素。大量臨床試驗(yàn)證明，血漿甘油三酯（TC）和低密度脂蛋白-膽固醇（LDL-C）水平升高或高密度脂蛋白-膽固醇（HDL-C）水平下降，都會(huì)使冠心病的危險(xiǎn)性增加，與此相反，降低血漿TC和LDL-C水平或升高HDL-C水平，可延緩動(dòng)脈粥樣硬化病變的進(jìn)展，減少冠心病的危險(xiǎn)性。極低密度脂蛋白（VLDL）和TC可能不是獨(dú)立的危險(xiǎn)因素，但是它們與心血管病的死亡率也有明顯聯(lián)系，所以，調(diào)整和控制血脂水平是降低動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病率和死亡率的重要手段之一。水飛薊素體外實(shí)驗(yàn)具有抑制3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A的作用。Krecman等人研究水飛薊素對(duì)高膽固醇飲食小鼠引起血膽固醇過(guò)多癥的抑制并以丙丁酚作對(duì)照藥。其結(jié)果表明：水飛薊素和丙丁酚對(duì)總膽固醇和VLDL-C和LDL-C及亞型HDLa和HDLb都有顯著升高作用，但丙丁酚只有降低作用。