《生物化學(xué)與分子生物學(xué)》 五、DNA限制性內(nèi)切酶圖譜分析

這是在上述篩選后的進(jìn)一步分析。目的序列插入載體會(huì)使載體DNA限制性酶圖譜（restriction map）發(fā)生變化，例如一個(gè)長(zhǎng)600bp的目的序列利用它兩端的EooR I和SalI切后的粘末端連接插入pUC19的多克隆點(diǎn)，則重組質(zhì)粒就增大為3.3kb，用Eoor I和SalI雙酶切后會(huì)出現(xiàn)600bp和-2.7kb兩個(gè)DNA片段，提取轉(zhuǎn)化細(xì)菌的質(zhì)粒DNA作酶切后做電泳觀察其酶切圖譜，就能分析得結(jié)果；如插入的目的序列中有其它限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)，也能在酶切電泳圖譜上觀察到。這就可以進(jìn)一步鑒定重組體是不是所要的目的克隆。