《免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗》 二、熒光偏振免疫測定

熒光物質(zhì)經(jīng)單一平面的偏振光藍(lán)光（波長485nm）照射后，可吸收光能躍入激發(fā)態(tài)；在恢復(fù)至基態(tài)時，釋放能量并發(fā)出單一平面的偏振熒光（波長525nm）。偏振熒光的強(qiáng)度與熒光物質(zhì)受激發(fā)時分子轉(zhuǎn)動的速度成反比。大分子物質(zhì)旋轉(zhuǎn)慢，發(fā)出的偏振熒光強(qiáng)；小分子物質(zhì)旋轉(zhuǎn)快，其偏振熒光弱。利用這一現(xiàn)象建立了熒光偏振免疫測定（floutescencepolarizationimmunoassay，F(xiàn)PIA），用于小分子物質(zhì)特別是藥物的測定。

FPIA的試劑為熒光素標(biāo)記的藥物和抗藥物的抗體，模式為均相競爭法，標(biāo)本中的藥物與熒光標(biāo)記的藥物與一定量的抗體競爭結(jié)合。反應(yīng)平衡后，與抗體結(jié)合的熒光標(biāo)記藥物的量與標(biāo)本中藥物濃度的量呈反比。由于抗體的分子量遠(yuǎn)大于藥物的分子量，游離的熒光標(biāo)記藥物與結(jié)合抗體的熒光標(biāo)記藥物所產(chǎn)生的偏振熒光強(qiáng)度相差甚遠(yuǎn)。因此在FPIA中測定的偏振熒光強(qiáng)度與標(biāo)本中藥物的濃度呈反比。