《免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗》 第六節(jié)　酶免疫測定的應(yīng)用

酶免疫測定具有高度的敏感性和特異性，幾乎所有的可溶性抗原抗體系統(tǒng)均可用以檢測。它的最小可測值達ng甚至pg水平。與放射免疫分析相比，酶免疫測定的優(yōu)點是標(biāo)記試劑比較穩(wěn)定，且無放射性危害。因此，酶免疫測定的應(yīng)用日新月異，酶免疫測定的新方法、新技術(shù)不斷發(fā)展。但酶免疫測定在醫(yī)學(xué)檢驗中的普及應(yīng)歸功于商品試劑盒和自動或半自動檢測儀器的問世。酶免疫測定步驟復(fù)雜，試劑制備困難。只有用符合要求的試劑和標(biāo)準(zhǔn)化的操作，才能獲得滿意的結(jié)果。

商品ELISA試劑盒中應(yīng)包含包被好的固相載體、酶結(jié)合物底物和洗滌液等。先進的試劑盒不僅提供全部試劑成分，而且所有試劑均已配制成應(yīng)用液，并在各種試劑中加色素，使之呈現(xiàn)不同的顏色。ELISA操作步驟多，所需試劑也多，這種有色試劑既方便操作又有利于減少操作錯誤。ELISA所有儀器除定量測定中必需的出色儀（專用的稱為ELISA測讀儀）外，洗滌板也極有用。洗滌機的使用不僅省時省工，而且也利于操作標(biāo)準(zhǔn)化，對中小型實驗室是實用且易于接受的。但應(yīng)注意在采用洗板機前，應(yīng)先對洗板機的性能加以檢定，確認各孔的洗滌效果是否徹底，且重復(fù)性好。

半自動和自動化ELISA分析儀亦趨成熟，并在大中型臨床檢驗實驗室中取得應(yīng)用。自動化ELISA分析儀有開放系統(tǒng)（opensystem）和封閉系統(tǒng)(closesystem)兩類。前者適用于所有的96孔板的ELISA測定；后者只與特定試劑配套使用。

均相酶免疫測定主要用于藥物和小分子物質(zhì)的檢測。ELISA則應(yīng)用更為廣泛，可用以檢測的項目包括以下幾個方面：

1．病原體及其抗體廣泛應(yīng)用于傳染病的診斷。病毒肝炎病毒、風(fēng)疹病毒、皰疹病毒、輪狀病毒等；細菌如鏈球菌、結(jié)核分枝桿菌、幽門螺桿菌和布氏桿菌等；寄生蟲如弓形體、阿米巴、瘧原蟲等。

2．蛋白質(zhì)各種免疫球蛋白、補體組分、腫瘤標(biāo)志物（例如甲胎蛋白、癌胚抗原、前列腺特異性抗原等）、各種血漿蛋白質(zhì)、同工酶（如肌酸激酸MB）、激素（如HGG、FSH、TSH）。

3．非肽類激素如T3、T4、雌激素、皮質(zhì)醇等。

4．藥物和毒品如地高辛、苯巴比妥、慶大霉素、嗎啡等。