《臨床生物化學(xué)》 一、方法建立的原理確定

臨床生化方法按其傳統(tǒng)分類可分為光譜法、層析法、電泳法、酶法、電化學(xué)法、分子生物學(xué)和免疫化學(xué)法等，這些方法的建立首先要根據(jù)其技術(shù)的原理（詳見(jiàn)前面有關(guān)章節(jié)）和被測(cè)物質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)來(lái)確定其方法建立的原理，例如亮度法測(cè)定的對(duì)象是各種有色物質(zhì)，有色物質(zhì)溶液的顏色深淺與其濃度有一定的關(guān)系，濃度大時(shí)色深，濃度小時(shí)色淺，比較顏色的深淺即可測(cè)知待測(cè)物質(zhì)的濃度。為此，首先要知道待測(cè)物質(zhì)本身是否有色，若本身無(wú)色，能與何種物質(zhì)在什么條件下呈色，弄清后即可與一已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品作比較，然后分別測(cè)出兩者的吸亮度，從郎伯-比耳定律可得知：

由于分析的物質(zhì)相同，處理也一樣，故K值相同，再因?yàn)闇y(cè)定時(shí)用同樣比色皿（L1＝L2），所以光度法中測(cè)得未知液與標(biāo)準(zhǔn)液吸光度的比值就等于其濃度的比值。（A1/A2＝C1/C2）。如C1為未知物濃度，則可得到計(jì)算公式如下：

C1＝A1×C2/A2

只要再乘以測(cè)定時(shí)標(biāo)本的稀釋倍數(shù)，即為通常光度法測(cè)定的通用的計(jì)算公式，但此公式只有在測(cè)定時(shí)空白管為零的條件下才適用。