《臨床生物化學(xué)》 二、細(xì)胞調(diào)節(jié)因子實(shí)驗(yàn)室檢測的簡介

研究細(xì)胞因子在各種病理生理情況下的活動、分泌以及在治療中使用細(xì)胞因子制劑的效應(yīng)，都要求能有效地檢測體內(nèi)細(xì)胞因子的含量（濃度水平），以及檢測細(xì)胞因子的功能（生物效應(yīng)）。

從前以細(xì)胞因子的生物學(xué)特征作為其含量分析的基礎(chǔ)，免疫分析及其它免疫化學(xué)或生物化學(xué)技術(shù)亦可用于此細(xì)胞因子的測定和部分鑒定，表2-14總結(jié)了已用于細(xì)胞因子功能測定和濃度（含量）測定的方法。

表2-14 細(xì)胞因子分析

生物分析酶聯(lián)免疫吸附分析（ELISA）動物分析其它增殖分析受體結(jié)合分析骨髓集落形成分析免疫化學(xué)程序細(xì)胞毒性或細(xì)胞穩(wěn)定性分析細(xì)胞或細(xì)胞中的測定抗病毒分析勻漿生物分析或免疫分析次級分子分泌的誘導(dǎo)免疫組化或免疫細(xì)胞分析趨化作用或化學(xué)促進(jìn)作用分析流式細(xì)胞計(jì)數(shù)細(xì)胞因子分泌活性的抑制酶聯(lián)免疫印跡（ELISPOT）免疫分析反相溶血斑分析放射免疫分析（RIA）細(xì)胞因子mRNA原位雜交免疫放射光譜分析（IRMA）

人細(xì)胞因子實(shí)驗(yàn)測定的標(biāo)準(zhǔn)化：人細(xì)胞因子的實(shí)驗(yàn)測定中仍存在諸多問題，選擇分析方法不恰當(dāng)則可能導(dǎo)致混亂甚至錯誤的結(jié)論。有時有必要同時選擇幾種方法分析某些細(xì)胞因子。生物分析方法特異性差，那些使用細(xì)胞株的生物分析可能與不同細(xì)胞因子反應(yīng)，而且可受非細(xì)胞因子分子的影響。用于維持細(xì)胞生物的細(xì)胞因子能強(qiáng)烈地影響某些依賴細(xì)胞對一些細(xì)胞因子的反應(yīng)程度。有的細(xì)胞在連續(xù)傳代后可能失去對某些細(xì)胞因子的反應(yīng)性，此外，由于抑制劑如受體拮抗劑、可溶性細(xì)胞因子受體或其他拮抗劑分子的存在，測得細(xì)胞因子活性結(jié)果可能會比實(shí)際活性偏低。

由于蛋白酶的存在或與抑制劑如可溶性受體形成復(fù)合物，免疫分析能測得失去生物活性或具部分生物活性的細(xì)胞因子分子，并可受到基質(zhì)效應(yīng)的影響。此外，特異性問題影響了細(xì)胞因子mRNA測定，而mRNA水平亦不一定與具生物活性的細(xì)胞因子水平相一致。其它影響自動免疫分析方法準(zhǔn)確性的問題還包括抗體的選擇、分析的不均勻、分子糖基化的不同、寡聚體的形成及循環(huán)受體的影響，雖然免疫分析的結(jié)果并不一定反映細(xì)胞因子的生物活性，但一般而言，免疫分析及其它配體結(jié)合分析都更容易標(biāo)準(zhǔn)化。

目前，英國已能提供下列細(xì)胞因子的標(biāo)準(zhǔn)化參考試劑：IL-1α，IL-1β，IL-2-9，GM-SCF，M-CSF，TGF-α，TGF-β，TGF-γ，SCF，LIF（白血病抑制因子），IFN-α1，IFN-α2b，IFNγ，還能供應(yīng)IFN-α2a，IFN-β及IFN-γ的國際標(biāo)準(zhǔn)。但于細(xì)胞因子分子的不均勻，其分析的標(biāo)準(zhǔn)化仍是問題。因此，要求各實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞因子分析應(yīng)參考國際標(biāo)準(zhǔn)。某些細(xì)胞因子具有易被破壞的特性，從而要求非常細(xì)致和標(biāo)準(zhǔn)化的取樣。

隨著細(xì)胞因子在治療上的不斷應(yīng)用，其測定方法亦得到了廣泛的發(fā)展，臨床檢師必須選用正常的分析方法支持臨床醫(yī)生，為臨床診斷提供相對簡易的實(shí)驗(yàn)程序和準(zhǔn)確的操作技術(shù)。