《動(dòng)脈粥樣硬化》 二、酶法（GK-GPO-POD比色法）

血清中甘油三酯經(jīng)脂肪酶水解為甘油和脂肪酸，甘油在甘油激酶（GK）及ATP存在下，生成3-磷酸甘油，爾后，在磷酸甘油氧化酶（GPO）作用氧化成磷酸二羥丙酮并生成H2O2，H2O2與底物4-氨基安替比林和ESPAS在過氧化物酶（POD）作用下，生成紅色亞醌化合物（quinoneimine），比色（500nm），其顏色深淺與甘油三酯含量成正比。

（一）手工測(cè)定法

1．試劑組成

代號(hào)種類濃度貯存2～8℃R1磷酸甘油氧化酶≥3.0KU/L冷藏（A液）抗壞血酸氧化酶≥1.0KU/L甘油激酶≥0.7KU/L4-氨基安替比林80mg/LR2脂蛋白脂酶≥2.0KU/L冷藏過氧化物酶≥10KU/LESPAS300mg/LR3（參考液）甘油酸三脂200mg/dl（2.26mmol/L）冷藏

*：一般采用商品試劑盒

圖15-4 血清甘油三酯測(cè)定法（酶法）操作圖

2．操作

按圖15-4操作。

3．計(jì)算

血清TG濃度=ESA/EST×2.26(mmol/L)

（二）生化分析儀檢測(cè)

全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定操作（以CL-7200型為例）。

1．試劑

A液：GK，GPO，4-AA-P、抗壞血酸氧化酶等。

B液：POD，Lipase,ESPAS等。

標(biāo)準(zhǔn)液：甘油三油酸酯 200mg/dl(2.26mmol/L)。

2．上機(jī)參數(shù)

名稱參數(shù)方法終點(diǎn)法波長(zhǎng)雙波長(zhǎng)（540nm 700nm）試劑A反應(yīng)時(shí)間2～3min試劑B反應(yīng)時(shí)間5～6min反應(yīng)溫度37℃樣本用量4μl試劑A用量200μl試劑B用量100μl單位mmol/L

3．操作過程

4．計(jì)算

以△A=A2-A1并根據(jù)同樣之標(biāo)準(zhǔn)或質(zhì)控物計(jì)算，自動(dòng)打印結(jié)果。

5．注意事項(xiàng)

①試劑與樣本量可根據(jù)分析儀要求按比例改變。

②試劑在有效期內(nèi)2～8℃避光保存。

③樣本中甘油三酯含量超過11mmol/L需用生理鹽水稀釋后再測(cè)。