中醫(yī)古籍
  • 《中國幽門螺桿菌研究》 7 關(guān)于診斷方法

    檢出Hp最可靠的細(xì)菌學(xué)方法是Warthin-Starry銀染色法。此法不但Hp染得好,且易與污染菌及組織碎片鑒別。要提高檢出陽性率,新西蘭學(xué)者的經(jīng)驗(yàn)是:①至少取4塊活檢標(biāo)本,因?yàn)榧幢阍谕徊课?,Hp可能呈斑塊狀不均勻分布;②組織學(xué)檢查與微生物培養(yǎng)各送2塊;③用加血的巧克力培養(yǎng)基;④涂片檢查效果不好,用印片檢查,陽性率可提高20%;⑤培養(yǎng)基平板至少應(yīng)放置1周,因Hp生長緩慢。

    改良的Giemsa染色法(即不用鑒別染色)快速簡便,與銀染色法同樣可靠。經(jīng)福爾馬林固定、石蠟包埋的胃活檢切片中的Hp,可用吖啶橙染色法來鑒定。此法操作簡單,Hp好辨認(rèn),對我國Hp的研究有實(shí)用價(jià)值。

    快速診斷法適應(yīng)胃鏡檢查的需要。其基本原理是Hp具有極強(qiáng)的尿素酶活力,能分解尿素為氨及二氧化碳,氨可用多種方法檢出。在用Christensen尿素液作基質(zhì)時(shí),如有氨釋出,溶液從棕色變?yōu)榉奂t色。有人檢查了112塊活檢組織,證實(shí)此法與組織培養(yǎng)法極為吻合,組織培養(yǎng)陽性的66例中,尿素酶試驗(yàn)60例陽性;培養(yǎng)陰性的46例中,尿素酶試驗(yàn)45例陰性;且顯色速度和顏色深度與標(biāo)本中的細(xì)菌數(shù)大致平行?,F(xiàn)應(yīng)用專用的尿素液,可縮短反應(yīng)時(shí)間,且尿素酶活力的對數(shù)與銀染色法檢出Hp間直接相關(guān),尿素酶陽性的程度又與炎癥細(xì)胞浸潤程度相關(guān)。澳大利亞Dalta West公司提供了一種稱之為CLO test的微皿,內(nèi)盛尿素瓊脂及指示劑,用前預(yù)熱至30°C,然后將鏡檢時(shí)取得的活組織塊置入其中,陽性時(shí)活組織周圍呈紅/粉紅色,陰性時(shí)原黃色不變,只需10min即可出結(jié)果。對205例胃鏡檢病人所作的前瞻性研究證實(shí)此法簡便、準(zhǔn)確、可靠。

    最近有人報(bào)告了一種快速非侵入性Hp診斷法—13C尿素呼吸試驗(yàn),有Hp感染者,在口服13C—尿素后20min,13CO2即出現(xiàn)于呼出氣體中,在100min內(nèi)以恒定的比例累增;無感染者則無13CO2呼出。此法安全,可重復(fù),可用于流行病學(xué)調(diào)查及觀察治療反應(yīng),但設(shè)備條件要求高。

    但是,不論采用何種方法,都可能有假陰性,其原因是多方面的。胃鏡檢查時(shí)可造成假陰性的原因是:咽下了利多卡因或服過二甲基硅油(去泡劑);活檢鉗沾上了戉二醛(電鏡檢查標(biāo)本之固定劑);或所取為腸腺化生上皮。服用過鉍劑、抗生素,胃內(nèi)有甲氰脒胍或呋喃硝胺,也都可造成假陰性。

    有關(guān)Hp感染后免疫學(xué)的研究,近兩年來甚為活躍。如31例Hp培養(yǎng)陽性的病人,100%補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)陽性,87%細(xì)菌凝集反應(yīng)陽性;Hp的存在、抗體的檢出與組織學(xué)證實(shí)的胃炎三者間有極密切聯(lián)系。用酶聯(lián)免疫法發(fā)現(xiàn),Hp陽性的NUD病人血清中IgG抗體(全身免疫保衛(wèi)系統(tǒng)中的主要抗體)、IgA抗體(漿膜粘液分泌的主要局部抗體)均明顯增高,尤以前者為著。不過,這些病人抗其他彎曲菌(空腸、痰、糞、胚胎彎曲菌)的抗體滴度也升高,說明抗原有交叉反應(yīng)。進(jìn)一步用免疫氧化酶技術(shù)證實(shí)胃炎粘膜切片中的Hp 被IgG、IgA、和IgM所覆蓋,但它們并未能清除Hp,處于胃小窩深處的Hp則不被覆蓋,說明Hp在此處受到保護(hù)。

    最近報(bào)告用免疫吸附(immunoblotting)發(fā)現(xiàn)十二指腸潰瘍病人的血清對Hp有特異性免疫反應(yīng),這種特異性抗體,兒童低于實(shí)驗(yàn)室工作人員,后者又低于潰瘍病人,三組之間并無重疊現(xiàn)象。Hp陽性病人接受鉍劑或抗生素治療后用被動(dòng)血凝法測出的抗體滴度,隨著治療好轉(zhuǎn)而下降。

    19世紀(jì)末期就已發(fā)現(xiàn)潰瘍病人胃組織中有細(xì)菌存在。從Marshall等開始的有關(guān)Hp的研究,可能將使胃炎(消化性潰瘍?)的病因?qū)W和治療學(xué)方面的研究有重大突破。我國慢性胃炎的發(fā)病率很高;我們在用痢特靈等治療潰瘍病方面已經(jīng)開始了很有意義的工作,也許這些都和Hp研究有密切關(guān)系。我們可以從下述幾方面著手工作:①學(xué)習(xí)有關(guān)Hp的基本知識(shí),檢查方法和研究進(jìn)展;②組織起來,對過去胃鏡檢查的大量病例,有計(jì)劃地作回顧性研究,摸清基本情況,隨訪不同條件的群、組的發(fā)展與轉(zhuǎn)歸;③摸索動(dòng)物模型的問題;④開展前瞻性、雙盲對照治療研究,選擇對胃炎、潰瘍無作用而為Hp敏感的藥物,包括中藥,進(jìn)行試驗(yàn),觀察清除Hp對炎癥、潰瘍的影響(包括愈合、復(fù)發(fā)等方面);⑤采用精確分析方法,研究Hp感染后機(jī)體某些重要成分的改變與Hp致病物質(zhì);⑥利用過去胃鏡普查資料,作我國Hp流行病學(xué)研究;⑦注意Hp與其他常見?。ㄈ缥赴┑年P(guān)系,等等??赡軐⑹且粋€(gè)十分廣闊的新領(lǐng)域。

    (本文系作者在澳大利亞悉尼大學(xué)及皇家北岸醫(yī)院內(nèi)科進(jìn)修時(shí)完成,曾得到Piper教授的熱情指導(dǎo)和澳中理事會(huì)的支持,謹(jǐn)致謝意)。

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