《醫(yī)學微生物學》 三、微生物學診斷

乙腦早期快速診斷通常采集性期患者血清或腦脊液特異性lgm ，也可做RT—PCR檢測標本中的病毒核酸片段，一般6個小時內可初步報告結果。常規(guī)血清學試驗，（H1、CF、NT）需取雙份血清，同時做對比試驗，當恢復期血清抗體滴度比急性期≥4倍時，有輔助診斷意義，可用于臨床回顧性診斷。由于乙腦患者病毒血癥期短，直接檢出病毒抗原或分離病毒陽性率低，較少用于診斷試驗。

（一）特異性lgM檢測

乙腦病毒感染發(fā)病早期即產(chǎn)生特異性lgM ，病后2～3周達到高峰，故單份血清可做出早期診斷?？墒褂茫孩賚gM 捕捉ELISA法（見23章）； ②2ME—NI法，血凝抑制抗體存在于lgM及l(fā)gG中，將早期單份血清分成二份，一份用2巰基乙醇（2ME）處理，以破壞lgM ，另一份不處理，然后同時做HI試驗，若處理血清抗體滴度比未處理的下降≥4倍，則為lgm 陽性； ③微量間接免疫熒光法，用熒光素標記的抗u鏈血清，檢測已與細胞抗原片結合的lgM，根據(jù)特異性熒光顆粒，判斷血清標本中的lgM存在。

（二）常規(guī)血清學試驗

1．血凝抑制試驗對乙腦診斷而言，本法特異性較低，但敏感性高，簡便易行。常用于病毒的初步鑒定，確定有無乙腦病毒存在。檢測血清標本中的HI抗體，多采用2ME—HI法。

2．補體結合試驗 補體結合抗體僅存在于lgg 中，病后出現(xiàn)遲，消失快，適用于診斷近期感染。

3．中和試驗 抗體存在于lgG、 lgM中，出現(xiàn)早，維持久。中和試驗特異性和敏感性都高，但操作繁雜，需用大量動物或組織培養(yǎng)管，需時較久，不適于臨床診斷常規(guī)使用，而在血清學流行病學調查和病毒鑒定上有價值。

（三）病毒分離與鑒定

取病尸腦組織研磨成10%懸液，接種1-3日齡乳鼠腦內，待發(fā)病頻死時，取腦懸液，用單克隆抗體做中和試驗鑒定病毒。也可接種敏感細胞（如C6/36細胞系）分離病毒。