《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》 一、BCR和TCR基因重排檢測

對血細(xì)胞惡性變?nèi)绨籽　⒘馨土龅鹊脑\斷，長期以來多應(yīng)用細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查和免疫細(xì)胞表型分析。由于這些方法在特異性和敏感性上的限制，對于丟失了細(xì)胞表面標(biāo)志，或分化較好難以和正常細(xì)胞區(qū)別。也可能由于惡性細(xì)胞數(shù)量少，混在大量正常細(xì)胞中難以查出。近年來由于分子生物學(xué)技術(shù)的廣泛應(yīng)用，且由于獲得了Ig片段的特異基因克隆及TCR各鏈的基因克隆，在此基礎(chǔ)上發(fā)展了應(yīng)用Ig基因重排作為B細(xì)胞的特異標(biāo)記，診斷B細(xì)胞來源的白血病的和應(yīng)用TCR基因重排為T細(xì)胞特異標(biāo)志診斷T細(xì)胞惡性變引起的白血病，從而將白血病的細(xì)胞學(xué)分類法提高到基因水平分析，建立了免疫基因型診斷的新方法，大大提高了診斷的敏感性和特異性。該方法不但可以確定細(xì)胞來源、分化程度，且由于DNA分析的高度敏感性而能查出顯微鏡不能看到的微小變化，從而能監(jiān)測治療效果，發(fā)現(xiàn)微量殘留病變細(xì)胞。

該方法首先要從待檢的細(xì)胞中分離出總DNA。在非T、非B細(xì)胞的Ig和TCR基因不發(fā)生重排稱為胚基因（germ line）。而T和B細(xì)胞在分化早期即有TCR和Ig基因重排，重排后的Ig和TCR片段，轉(zhuǎn)移至硝酸纖維膜或尼龍膜上，然后用同位素或酶標(biāo)記的Ig血病細(xì)胞進行分類鑒定，若有Ig基因重排說明惡性細(xì)胞來源于B細(xì)胞，若有TCR基因發(fā)生重排，則為T細(xì)胞來源的。如果既無Ig基因重排，又無TCR基因重排的淋巴細(xì)胞則屬非T、非B細(xì)胞來源的瘤細(xì)胞。