《生物化學(xué)與分子生物學(xué)》 一、基因組DNA文庫

從生物組織細(xì)胞提取出全部DNA，用物理方法（超聲波、攪拌剪力等）或酶法（限制性核酸內(nèi)切酶的不完全酶解）將DNA降解成預(yù)期大小的片段，然后將這些片段與適當(dāng)?shù)妮d體（常用噬菌體、粘?；験AC載體）連接，轉(zhuǎn)入受體細(xì)菌或細(xì)胞，這樣每一個細(xì)胞接受了含有一個基因組DNA片段與載體連接的重組DNA分子，而且可以繁殖擴(kuò)增，許多細(xì)胞一起組成一個含有基因組各DNA片段克隆的集合體，就稱為基因組DNA文庫（genomic DNA library）。如果這個文庫足夠大，能包含該生物基因組DNA全部的序列，就是該生物完整的基因組文庫，能從這文庫中釣取該生物的全部基因或DNA序列。從基因組含有生物生存、活動和繁殖的全部遺傳信息的概念出發(fā)，基因組文庫是具有生物種屬特異性的。

構(gòu)建基因組文庫，再用分子雜交等技術(shù)去釣取基因克隆的方法，稱為鳥槍法或散彈射擊法，意味著從含有眾多的基因序列克隆群中去獲取目的基因或序列。當(dāng)生物基因組比較小時，此法較易成功；當(dāng)生物基因組很大時，構(gòu)建其完整的基因組文庫就非易事，從龐大的文庫中去克隆目的基因工程量也很大。

圖20-8　基因組DNA文庫的構(gòu)建