《生物化學(xué)與分子生物學(xué)》 第二節(jié)　基因工程載體

基因工程是要按人們的意愿去有目的地改造，創(chuàng)建生物遺傳性，因此其最基本的工程就是要得到目的基因或核酸序列的克隆。分離或改建的基因和核酸序列自身不能繁殖，需要載體攜帶它們到合適的細(xì)胞中復(fù)制和表現(xiàn)功能。對(duì)理想的基因工程載體一般至少有以下幾點(diǎn)要求：

①能在宿主細(xì)胞中復(fù)制繁殖，而且最好要有較高的自主復(fù)制能力。

②容易進(jìn)入宿主細(xì)胞，而且進(jìn)入效率越高越好。

③容易插入外來(lái)核酸片段，插入后不影響其進(jìn)入宿主細(xì)胞和在細(xì)胞中的復(fù)制。這就要求載體DNA上要有合適的限制性核酸內(nèi)切酶位點(diǎn)。

④容易從宿主細(xì)胞中分離純化出來(lái)，這才便于重組操作。

⑤有容易被識(shí)別篩選的標(biāo)志，當(dāng)其進(jìn)入宿主細(xì)胞、或攜帶著外來(lái)的核酸序列進(jìn)入宿主細(xì)胞都能容易被辨認(rèn)和分離出來(lái)。這才介于克隆操作。

常用的載體有質(zhì)粒，噬菌體和病毒等。