中醫(yī)古籍
  • 《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)》 七、近交系大、小鼠遺傳質(zhì)量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

    (一)管理制度

    1.引種來(lái)源清楚,應(yīng)帶有譜系及特性資料(如近交代數(shù)、交配方式、遺傳組成、生物學(xué)特性),并應(yīng)符合國(guó)際公認(rèn)的遺傳概貌標(biāo)準(zhǔn)。

    2.按國(guó)際規(guī)定的近交系動(dòng)物的繁殖系統(tǒng),進(jìn)行種群維持和生產(chǎn)。

    (1)基礎(chǔ)群和血緣擴(kuò)大群:

    應(yīng)以同胞兄妹交配方法進(jìn)行。基礎(chǔ)群的維持一定按著近交系的保種方法進(jìn)行,并應(yīng)具有譜系及個(gè)體卡片記錄。

    (2)生產(chǎn)群:

    以隨機(jī)交配方法(或紅綠燈方法)進(jìn)行生產(chǎn)??蛇B續(xù)繁殖3-5代,其生產(chǎn)群種鼠應(yīng)與基礎(chǔ)群血緣關(guān)系保持相對(duì)平行。

    (二)遺傳質(zhì)量檢查

    1.方法的選擇:

    (1)異體皮膚移殖法:無(wú)論是大鼠,還是小鼠異體皮膚移植的方法,一直是鑒定近交品系的經(jīng)典方法,由于該方法既經(jīng)濟(jì),又權(quán)威,為首選方法。

    (2)生化電泳方法:是近些年來(lái)利用同功酶和蛋白質(zhì)的多態(tài)性對(duì)近交系動(dòng)物進(jìn)行遺傳監(jiān)測(cè)的一種常規(guī)方法。由于其快速、準(zhǔn)確、靈敏,在檢出亞系動(dòng)物時(shí),比起皮膚移殖法,有其獨(dú)特之處,可作為近交系小鼠遺傳質(zhì)量檢查的又一重要方法。

    2.位點(diǎn)的選擇:

    近交系動(dòng)物遺傳品質(zhì)的變異,主要有三方面的因素:

    (1)遺傳污染;

    (2)遺傳漂變;

    (3)遺傳突變。

    在這三方面中遺傳污染危害最大,而另兩方面,在一定時(shí)間內(nèi)發(fā)生改變的頻率很低。因此,在位點(diǎn)選擇上,根據(jù)北京市現(xiàn)在常用的10種近交系小鼠,選擇了位于7個(gè)染色體上八個(gè)差異性位點(diǎn),作為檢查的第一線位點(diǎn)。如果任何一種品系發(fā)生過(guò)遺傳污染,這八個(gè)位點(diǎn)中某些位點(diǎn)將會(huì)出現(xiàn)雜合或者變異。考慮到位點(diǎn)的選擇盡量分布在多個(gè)染色體上,我們又選擇了位于5個(gè)染色體上的五個(gè)比較容易操作,耗資較少的位點(diǎn)作為第二線位點(diǎn)的檢查。原則上,第一線位點(diǎn)的檢查如果發(fā)現(xiàn)了問(wèn)題,將不再進(jìn)行第二線位點(diǎn)的檢查。

    第一線位點(diǎn):

    Hbb,Car-2,Gpd,ES-1,ES-3,Trf,Gp1,ldh-1。

    第二線位點(diǎn):

    Mup,Pgm-1,ES-10,Sep-1,Ce-2。

    3.動(dòng)物的選擇:

    近交系大、小鼠每個(gè)品系至少進(jìn)行四只動(dòng)物的異體皮膚移植。近交系小鼠皮膚移植成功者還需從核心群中選送四只動(dòng)物(2♀,2♂年齡不限)進(jìn)行生化位點(diǎn)的檢查。皮膚移植失敗者,則不考慮進(jìn)行生化位點(diǎn)的檢查。

    4.結(jié)果的判斷:

    將檢測(cè)報(bào)告匯總,由專家小組作出結(jié)論。

    見(jiàn)附表五:差異性位點(diǎn)的選擇和10種近交系小鼠的遺傳概貌。

    表五

    Chromosome Locus/Strain734811971HbbCar-2GpdES-1ES-3TrfGpiLdh-1615SabbObaaTA1SbbaabaTa2dabbcbbaT739SbbbObaaBALA/CdbbbabaaC57BL/OSaaaabbaCBA/NdabbcabbC3H/HedbbbcbbaDBA/2dbbbcbabKKSaabcbba
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