《臨床生物化學》 二、乳酸脫氫酶（LD）及其同工酶

乳酸脫氫酶（LD）酶催化下列反應：

不同方法測出LD結果差異較大，這是因為LD有5種不同的同工酶，每種同工酶的最適反應條件不同。例如同為催化乳酸變?yōu)楸幔琇D1的最適pH為9.8，而LD5的最適pH為8.8。很難找出一個測定血清總LD的最適條件，檢驗醫(yī)師在解釋測定結果時應加以注意。

LD催化反應是無氧糖酵解的最終反應，廣泛存在于人體各組織中，故測總酶臨床意義不大，但LD是由兩種不同亞基（M，H）組成的四聚體，形成5種結構不同的同工酶，其中H型亞基中酸性氨基酸較多，電泳時負電荷多，因此電泳速率較快。按電泳向陽極泳動快慢，分別命名為LD1（H4），LD2（H3M），LD3（H2M2），LD4（HM3）和LD5（M4）。

【組織分布】

LD雖廣泛存在于人體各組織中，但是不同組織中同工酶組成有差異，大致可分為三類：一類以LD1為主，心肌為此類代表，LD可占總酶活性50％以上，此外有紅細胞等。另一類以LD5為主，以橫紋肌為代表，此外有肝臟等。第三類以LD3為主，脾、肺為此類代表。LD主要存在于細胞質中，線粒體中未查到。

【生理變異】

血清LD高低和性別關系不大，嬰兒酶活性可達成年人兩倍，兒童和少年活性比成年人高10％-15％，血清LD同工酶目前常用電泳法測定，由于具體方法差異，各學者報告的結果出入較大，但在成年人存在著如下規(guī)律：LD2＞LD1＞LD3＞LD4＞LD5，值得注意的是有學者報告，部分正常兒童血中LD1可大于LD2。

【標本的采集、處理和貯存】

由于血小板中也含大量LD，血清中和血漿所測LD有一定差異，一般都選用血清為測定標本，采血后應迅速分離血清，因紅細胞中LD含量比血清高100倍以上，不宜用溶血血清為測定標本。

LD尤其是LD4和LD5與其它酶不同，不是熱變性而是冷變性，在4℃貯存活性下降快于室溫25℃，一般說25℃放2-3天LD活性變化不大，有條件者最好還是在采血后24小時內測定，標本應貯存于室溫。

【參考值范圍】

根據催化反應方向的不同，有兩大類測LD方法，一大類為國際臨床化學協會（IFFC）推薦方法，以丙酮酸為底物，其參考值范圍為80-500U/L（37℃）；另一大類以乳酸為底物，在我國應用較普遍，其參考值范圍為50-150U/L。

【臨床應用】

LD及其同工酶是臨床上常用酶之一，尤其是LD同工酶和CK-MB是臨床常規(guī)實驗室最常測的兩種同工酶。臨床常用于診斷和鑒別診斷心、肝和骨骼肌的疾病。表7-5是LD及其同工酶在這些疾病時的變化情況。

表7-5 總LD和LD同工酶在疾病的變化

疾病總LDLD同工酶AMI常測酶中，升高最慢（8-10h），但升高時間最長（5-10d），峰值可達10倍正常上限LD1＞LD2，并可持續(xù)到兩周（部分病例總LD正常）充血性心衰，心肌炎可升高達5倍正常上限LD1＞LD2增巨細胞性貧血可升高達5倍正常上限，治療正確迅速下降LD1＞LD2病毒性肝炎部分病例可升高達5倍正常上限LD5＞LD4（部分病例總LD正常肝硬化常輕度升高LD5明顯升高，LD5＞LD4高原發(fā)性肝癌部分病例升高LD5明顯升高，LD5＞LD4梗阻性黃疸不定常LD4＞LD5肌肉損傷視損傷程度不同而異以LD5升高為主肌萎縮可高達10倍正常上限以LD5為主某些惡性腫瘤（白血病，結腸癌……）可升高，個別病例高達5倍正常上限以LD3為主，LD3＞LD1變異某些病倒，電泳出現LD6，常顯示預后不佳

實用中此酶用于診斷AMI，特別是亞急性AMI。在AMI時，LD由于分子量較大（125000），在常用酶中升高最遲，但其半壽期較長，增高持續(xù)時間可達5-10天，此時其它酶活性已恢復正常，在亞急性AMI診斷上有一定價值。可惜的是，LD總酶診斷AMI的特異性較差，很多其它疾病，此酶都升高。LD同工酶則不同，診斷特異性可達95％以上，僅次于CK-MB，甚至有學者認為，只要測此二同工酶，不需作其它酶學檢查就可診斷AMI。LD同工酶的高特異性是因為人體各組織器官中LD同工酶的分布情況并不相同，除心肌外，只有少數器官如紅細胞中的LD是以LD1為主，絕大多數的AMI患者血中的LD同工酶都可出現LD1＞LD2變化，即所謂的“反轉”（flip）類型變化，其持續(xù)時間甚至可超過總LD升高時間，達兩周之久。臨床上可見部分患者在恢復期，所有酶活性都降至正常，但仍有“反轉”類型的LD同工酶變化，這些患者常有復發(fā)傾向，除AMI和心肌損傷，此種“反轉”類型變化還見于溶血性貧血和巨細胞性貧血，但此類疾病在臨床上不難與AMI相區(qū)分。

60年代臨床上曾經用過所謂“α-羥丁酸脫氫酶”的測定來診斷AMI。實際上并不存在這種酶，所測的主要是LD1的活性，目前國外已較少測定此酶而改用更精確的測LD同工酶的方法。

其次，LD及其同工酶常用于肝臟疾病的診斷和鑒別診斷，由于肝細胞中主要為LD1，在肝實質病變時常出現LD5＞LD4，但由于正常血清中LD5含量很少，不少病例就是出現同工酶異常LD5＞LD4時，總LD活性仍為正常，故LD同工酶檢查陽性率遠高于總LD，一般在膽道疾患或梗性黃疸早期未累及肝實質時，不出現LD5＞LD4，仍為LD4＞LD5。值得注意的是，在骨骼肌疾病和損傷時，也會出現類似變化，臨床上診斷各型肌萎縮也常測定LD及LD同工酶，早期常為LD5升高，但在晚期LD1和LD2也升高。

惡性腫瘤可由于腫瘤細胞惡性增長和壞死而引起血清LD升高，如轉移到肝臟往往伴有LD4和LD5升高，此外一部分腫瘤，如白血病等常有LD3和LD4的增高。