《臨床生物化學(xué)》 五、血漿蛋白質(zhì)的檢測及其臨床應(yīng)用

血漿蛋白質(zhì)的檢測及其臨床應(yīng)用可以概括為以下幾方面：

1．定量地用化學(xué)方法測定血漿總蛋白質(zhì)以及白蛋白。

2．通過電泳將血漿（或血清）蛋白質(zhì)初步分離，可以半定量地檢測主要蛋白質(zhì)的組分及其圖譜，如Alb、α1、α2、β1、β2、γ等區(qū)帶，并以相對百分比表示之。

3 ．特異的定量測定個(gè)別蛋白質(zhì)，多采用免疫化學(xué)的技術(shù)，通過制備特異的抗血清（或抗體）測定抗原-抗體復(fù)合物。依據(jù)抗原抗體結(jié)合及其復(fù)合物的檢測手段可有濁度亮度法、沉淀法、免疫擴(kuò)散法、免疫電泳法等。如果含量很微的蛋白質(zhì)則采用放射免疫測定法（RIA）及酶免疫測定法（EIA）。

此處僅從臨床的需要，對方法學(xué)的臨床應(yīng)用及其進(jìn)展作一簡介。

（一）血清總蛋白質(zhì)的測定

新鮮全血采取后經(jīng)自然凝固，析出血清，除去含量約為2-4μg/L的纖維蛋白原，剩下的即為血清蛋白質(zhì)。健康成人在活動狀態(tài)采血，其含量為63-83g/L，平臥休息時(shí)為60-78g/L。血漿總蛋白質(zhì)含量的變化不外兩大原因；一是血容量的改變（濃縮或稀釋）；二是個(gè)別蛋白質(zhì)組分的明顯增加或減少。血濃縮時(shí)的高血漿蛋白血癥，各個(gè)組分成比例的增加（病史中有失水史）。血稀釋時(shí)的低血漿蛋白血癥亦是相對的，各組分蛋白質(zhì)仍保持正常的比例。

由于個(gè)別蛋白質(zhì)的變化所致的低蛋白血癥，最多見的原因是低血漿白蛋白。輕度的高蛋白血癥可由于慢性感染性疾病引起的多克隆，彌散性的γ球蛋白增多癥是由于多發(fā)性骨髓瘤或異常蛋白血癥時(shí)單克隆免疫球蛋白增多。

應(yīng)當(dāng)指出，在進(jìn)行化學(xué)定量測定血漿蛋白質(zhì)時(shí)，我們作了如下假定：①所有血漿蛋白是純的多肽鏈（糖脂類和金屬有機(jī)物等均不計(jì)在內(nèi)），其含氮量平均為16%；②幾百種血漿蛋白其理化性質(zhì)雖不同，但與化學(xué)試劑作用產(chǎn)生的反應(yīng)（如呈色、沉淀）是一致的。顯然，這是過于理想化了的，事實(shí)上前一種情況是不存在的，后一種情況在不同蛋白質(zhì)之間也有很大的差別，因此采用任何一種化學(xué)方法作血漿蛋白質(zhì)的測定，嚴(yán)格來講都是從實(shí)用出發(fā)的，是相對的定量。

至今，凱氏定氮法仍然是建立各個(gè)具體方法時(shí)采用的參考標(biāo)準(zhǔn)方法。

雙縮脲比色法是目前首先推薦的蛋白質(zhì)定量方法。方法操作簡便，雖然雙縮脲試劑有大同不異。其中酒石酸鉀納可以穩(wěn)定在堿性溶液中的銅離子，含有碘化物作為抗氧化劑。雙縮脲反應(yīng)生成的復(fù)合物其吸收峰為540nm?？刹捎霉J(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)牛血清白蛋白作為標(biāo)準(zhǔn)品，經(jīng)精確稱量，必要時(shí)用凱氏定氮法標(biāo)定。各地質(zhì)控中心提供的混合標(biāo)準(zhǔn)血清可作為第二參考，血清用量100μl，在10-120g/L濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，批內(nèi)CV值