《中國(guó)幽門(mén)螺桿菌研究》 幽門(mén)螺桿菌與胃粘膜組織病理學(xué)

1983年澳大利亞學(xué)者Warren和Marshall再次在胃內(nèi)發(fā)現(xiàn)彎曲樣細(xì)菌以來(lái)，眾多學(xué)者對(duì)這一細(xì)菌（現(xiàn)稱之為幽門(mén)螺桿菌，Helicobater pylori,Hp）進(jìn)行了廣泛的研究，對(duì)該菌在胃部疾病中的致病作用做了一定的闡明，認(rèn)為Hp的感染與胃潰瘍、十二指腸潰瘍、非潰瘍性消化不良和慢性胃炎可能有關(guān)。自1985年到1987年，我們共對(duì)693例各種胃疾病的患者進(jìn)行了胃粘膜病理學(xué)、微生物學(xué)及其與臨床關(guān)系的研究，探討Hp在胃部疾病中的致病作用。

1 對(duì)象和方法

1.1 對(duì)象

本研究為因上消化道主訴而接受纖維胃鏡檢查的693例患者，其中男性478例，女性215例；年齡范圍24歲～68歲，平均42歲。經(jīng)胃粘膜病理學(xué)檢查確認(rèn)為慢性淺表性胃炎者300例，慢性萎縮性胃炎者393例，其中伴有腸化和（或）不典型增生者144例。

1.2 方法

活檢標(biāo)本98份均取距幽門(mén)3cm～5cm處的胃竇小彎粘膜組織，我們選用巧克力和血瓊脂平板培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，每次活檢后，立即將活檢組織投入無(wú)菌輸送液中（50%葡萄糖：生理鹽水=1:3），在2h內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。每次培養(yǎng)時(shí)，先將活檢組織在無(wú)菌生理鹽水中輕輕漂洗，以除去粘膜表面的雜質(zhì)成分，待清洗2min～3min后，用高壓滅菌的小剪刀將組織剪碎，將組織接種環(huán)接種于平板上，繼而投入燭缸，在微氧、37°C條件下培養(yǎng)5d～7d。693例胃竇小彎粘膜活檢組織用10%中性福爾馬林液固定，常規(guī)石蠟包埋、切片。目前認(rèn)為，除Warthin-Starry染色法以外，HE染色法亦可作為一種常規(guī)的檢測(cè)方法。我們選用HE染色法觀察幽門(mén)菌，同時(shí)將胃炎患者胃粘膜內(nèi)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)分為1級(jí)～3級(jí)，1級(jí)為局部視野內(nèi)有個(gè)別稀疏的淋巴細(xì)胞；2級(jí)為淋巴細(xì)胞數(shù)目介于1級(jí)～3級(jí)之間；3級(jí)為視野布滿淋巴細(xì)胞或有淋巴濾泡形成。在低倍鏡視野下觀察到有多形核白細(xì)胞稱為炎癥急性化。

本組對(duì)18例消化性潰瘍患者（胃潰瘍10例，十二指腸潰瘍8例）選用三鉀二枸櫞酸鉍（TDB，De-Nol荷蘭Gist-brcoades公司饋贈(zèng)）治療28d后，進(jìn)行了臨床對(duì)照觀察，結(jié)合病理研究，探討TDB的療效與幽門(mén)螺桿菌的關(guān)系。

上述結(jié)果均經(jīng)X2或團(tuán)體t檢驗(yàn)處理，求出其統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

幽門(mén)螺桿菌在胃炎和消化性潰瘍中的分離培養(yǎng)98份樣本中，培養(yǎng)出幽門(mén)螺桿菌者59例（表1），其中慢性胃炎51例，幽門(mén)螺桿菌培養(yǎng)陽(yáng)性32例，占62.7%，其中以淺表性胃炎的陽(yáng)性率最高，達(dá)91.3%。消化性潰瘍47例，培養(yǎng)出幽門(mén)螺桿菌者27例，占57.4%，消化性潰瘍并發(fā)淺表性胃炎者，陽(yáng)性率僅50.0%。細(xì)菌菌落形態(tài)呈圓形或橢圓形，培養(yǎng)5d后，菌落直徑一般在2mm～3mm，不產(chǎn)生色素，在多數(shù)呈單個(gè)菌落。生化特性：尿素酶（+），過(guò)氧化物酶（+），能產(chǎn)生H2S，Gram染色陰性。

表1 慢性胃炎中Hp培養(yǎng)結(jié)果

診斷nHp+陽(yáng)性數(shù)%單純性胃炎淺表性胃炎232191.3單純萎縮性胃炎17741.2萎縮性胃炎伴腸化或間變11436.4潰瘍并發(fā)胃炎淺表性胃炎28145.0萎縮性胃炎10770.0萎縮性胃炎伴腸化或間變9666.7

幽門(mén)螺桿菌可在慢性胃炎尤其是慢性淺表性胃炎患者的竇粘膜中檢出，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 Hp檢出率

病理診斷nHp+陽(yáng)性n%淺表性胃炎30027391.0b萎縮性胃炎24910240.9萎縮性胃炎伴腸化生或間變1443625.0

bP＜0.01。

根據(jù)如前所述的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)的程度，將淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)程度與幽門(mén)螺桿菌檢出率的關(guān)系統(tǒng)計(jì)如下（表3）。

表3 幽門(mén)螺桿菌與淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)的程度

淋巴細(xì)胞nHp+浸潤(rùn)程度n%1級(jí)14410592.12級(jí)1266653.43級(jí)1403021.4

本組隨機(jī)選用18例消化性潰瘍患者,給以De-Nol治療,每次120mg飯前半小時(shí)口服,每日3次,睡前再服120mg，共28d為1療程，治療前后用TDB復(fù)查，并作活檢。治療前細(xì)菌陽(yáng)性15例（83.3%），治療28d后潰瘍愈合者17例，愈合率94.4%，另1例為復(fù)合潰瘍，其球部潰瘍愈合，而胃潰瘍縮小。全部復(fù)查幽門(mén)螺桿菌，結(jié)果15例治療前為陽(yáng)性者中，有12例（77.8%）患者細(xì)菌消失，同時(shí)伴有組織形態(tài)學(xué)的改善。

3 討論

慢性胃炎可發(fā)生于胃竇或胃體部，其中常見(jiàn)為淺表性胃炎，后者胃粘膜腺體萎縮，并可出現(xiàn)腸腺化生和/或不典型增生。1983年以來(lái)一些研究表明，Hp感染與慢性胃炎及消化性潰瘍有關(guān)。本研究進(jìn)一步表明，Hp在慢性胃炎和消化性潰瘍中的分離陽(yáng)性較高，以單純淺表性胃炎檢出率最高（91.3%，P＜0.05）。細(xì)菌陽(yáng)性的切片中，有多核細(xì)胞（PMN）明顯浸潤(rùn)者可達(dá)92.3%，表明Hp和淺表性炎癥關(guān)系甚為密切，尤其是與炎癥急性化有關(guān)。胃粘膜組織病理學(xué)的研究表明，在各種慢性胃炎切片中，同樣以淺表性胃炎的陽(yáng)性率為最高（見(jiàn)表2），經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，三者相關(guān)非常顯著（P＜0.001）。因此，我們認(rèn)為，Hp感染對(duì)胃粘膜的致病作用主要是產(chǎn)生慢性胃炎，細(xì)菌本身直接導(dǎo)致消化性潰瘍的產(chǎn)生尚有疑問(wèn)。我們的資料還初步表明，細(xì)菌在淺表性胃炎（91%）、單純性胃炎（40.9%）及萎縮性胃炎腸化或不典型增生(25%)中的陽(yáng)性率是逐漸遞減的?？梢?jiàn)，胃部慢性炎癥的發(fā)展呈一個(gè)動(dòng)態(tài)變化，而Hp感染可能是一個(gè)起因，而在以后的發(fā)展中則可能是有其他因子參與，如自身免疫機(jī)制，出現(xiàn)抗壁細(xì)胞抗體等。

Hp與淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)程度有著密切的聯(lián)系（表3），淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)數(shù)增多，Hp陽(yáng)性者就越少（p＜0.01），由此可見(jiàn)，局部免疫反應(yīng)在清除細(xì)菌方面發(fā)揮重要作用。

有些研究表明，Hp對(duì)抗消化性潰瘍藥TDB敏感，受體阻斷劑治療消化性潰瘍有效，它可使癥狀減輕或消失，病情緩解，潰瘍愈合，但停藥后復(fù)發(fā)率卻明顯高于TDO。我們對(duì)18例消化性潰瘍患者采用TDB治療4W后，77.8%患者細(xì)菌轉(zhuǎn)陰，同時(shí)還伴有粘膜組織形態(tài)學(xué)上的改善，但是，關(guān)于Hp對(duì)慢性胃炎、消化性潰瘍愈合及其復(fù)發(fā)率的影響機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。