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Clayton等于1989年首次在大腸桿菌內(nèi)構(gòu)建了Hp的DNA基因庫。他們篩選出一株能同特異性抗血清反應(yīng)的陽性克?。é胏p2)。該克隆的表達產(chǎn)物系Mr66 000的多肽片斷。免疫印跡分析多肽能同特異性Hp抗血清反應(yīng)。將該DNA提取物經(jīng)內(nèi)切酶分析顯著該DNA尚含有一個17 000的DNA除編碼Mr66000的蛋白外,尚可編碼Mr31 000的蛋白質(zhì)抗原。免疫印跡顯示在大腸桿菌中表達的這些抗原同在Hp菌體的抗原具有相同的Mr,并存于所有Hp菌株內(nèi)。點雜交和間接免疫熒光染色證實由這些多肽產(chǎn)生的抗血清僅同Hp反應(yīng)。表達這些抗原的DNA經(jīng)用32p標記顯示僅能同Hp菌株雜交。用親和純化的尿素酶多克隆抗體的免疫印跡顯示這些克隆的抗原是尿素酶分子的一部分,但并無尿素酶活性。
用上述DNA探針和重組DNA表達Hp特異性抗原對探知無法培養(yǎng)的Hp,如唾液、糞便中細菌,探討其致病機理和血清學(xué)診斷會有較大幫助。一旦篩選出的DNA克隆能夠表達出特異性強、致免疫性高的抗原后,將會在臨床應(yīng)用中發(fā)揮更大的作用。
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Clayton等于1989年首次在大腸桿菌內(nèi)構(gòu)建了Hp的DNA基因庫。他們篩選出一株能同特異性抗血清反應(yīng)的陽性克?。é胏p2)。該克隆的表達產(chǎn)物系Mr66 000的多肽片斷。免疫印跡分析多肽能同特異性Hp抗血清反應(yīng)。將該DNA提取物經(jīng)內(nèi)切酶分析顯著該DNA尚含有一個17 000的DNA除編碼Mr66000的蛋白外,尚可編碼Mr31 000的蛋白質(zhì)抗原。免疫印跡顯示在大腸桿菌中表達的這些抗原同在Hp菌體的抗原具有相同的Mr,并存于所有Hp菌株內(nèi)。點雜交和間接免疫熒光染色證實由這些多肽產(chǎn)生的抗血清僅同Hp反應(yīng)。表達這些抗原的DNA經(jīng)用32p標記顯示僅能同Hp菌株雜交。用親和純化的尿素酶多克隆抗體的免疫印跡顯示這些克隆的抗原是尿素酶分子的一部分,但并無尿素酶活性。
用上述DNA探針和重組DNA表達Hp特異性抗原對探知無法培養(yǎng)的Hp,如唾液、糞便中細菌,探討其致病機理和血清學(xué)診斷會有較大幫助。一旦篩選出的DNA克隆能夠表達出特異性強、致免疫性高的抗原后,將會在臨床應(yīng)用中發(fā)揮更大的作用。