《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》 三、微生物學(xué)診斷

（一）分離與鑒定

1．標(biāo)本：根據(jù)傷寒病的病程采取不同標(biāo)本，通常第1～2周取血液，第2～3周取糞便或尿液。急性腸炎取患者吐瀉物和剩余食物。敗血癥取血液作培養(yǎng)。

2．分離培養(yǎng)與鑒定：血液應(yīng)先接種膽汗肉湯增菌；糞便和經(jīng)離心的尿沉渣可直接接種腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基。37℃經(jīng)18～24小時(shí)培養(yǎng)后,挑選無色半透明的不發(fā)酵乳糖的菌落涂片、染色、鏡檢，并接種雙糖含鐵或三糖含鐵培養(yǎng)基。疑為沙門氏桿菌時(shí)，作生化反應(yīng)和玻片凝集試驗(yàn)鑒定。

3.快速診斷法：近年來應(yīng)用葡萄球菌A蛋白協(xié)同凝集試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、放射免疫測定等方法，檢測患者血清或尿液中傷寒桿菌、副傷寒桿菌的可溶性抗原，協(xié)助臨床早期診斷腸熱癥。

（二）血清學(xué)試驗(yàn)

常用肥達(dá)（Widal）氏反應(yīng)。即用已知的傷寒桿菌O、H抗原和甲、乙型副傷寒桿菌的H抗原與待檢血作定量凝集試驗(yàn)。根據(jù)抗體含量多少及其增長情況，輔助臨床診斷腸熱癥。

腸熱癥常由傷寒桿菌，甲、乙型副傷寒桿菌引起，故通常采用上述三種菌的抗原進(jìn)行試驗(yàn)。有的地區(qū)可由丙型副傷寒桿菌引起，應(yīng)增添丙型副傷寒桿菌H抗原作試驗(yàn)。

本試驗(yàn)在腸熱癥患者第一周末時(shí)，即可出現(xiàn)陽性結(jié)果。判定結(jié)果時(shí)必須考慮下述情況。

1．正?？贵w水平：正常人因隱性感染或預(yù)防接種，血清中可含有一定量抗體，其效價(jià)隨各地區(qū)情況而不同。一般說來，O凝集價(jià)≥1：80、H凝集價(jià)≥1：160時(shí)才有診斷價(jià)值。

2．動(dòng)態(tài)觀察：判斷肥達(dá)氏反應(yīng)結(jié)果須結(jié)合臨床癥狀、病期等。單次凝集效價(jià)增高，有時(shí)不能定論。如間隔數(shù)天重復(fù)采用，若效價(jià)隨病程延長而逐漸上升4倍以上，有診斷意義。

3．O與H抗體在診斷上的意義：患腸熱癥后，O與H抗體在體內(nèi)的消長情況不同。LgM型O抗體出現(xiàn)較早，持續(xù)時(shí)間僅半年左右，消失后不易受傷寒、副傷寒桿菌以外細(xì)菌的非特異性抗原刺激而重新出現(xiàn)。lgG型H抗體出現(xiàn)較晚，維持時(shí)間可長達(dá)數(shù)年，消失后易受非特異性抗原刺激而短暫地重新出現(xiàn)。因此，①若H、O凝集效價(jià)均超過正常值，則感染傷寒、副傷寒的可能性大；②H與O效價(jià)均低，則患腸熱癥的可能性甚小；③若H效價(jià)高而O不高，可能系預(yù)防接種或非特異性回憶反應(yīng)；④如O效價(jià)高而H不高，可能是感染早期或其他沙門氏菌感染（腸炎桿菌與傷寒桿菌有共同O抗原）引起的交叉反應(yīng)。

4．其他：少數(shù)病例在整個(gè)病程中，肥達(dá)氏試驗(yàn)始終呈陰性?？赡苁洽侔l(fā)病早期曾用大量或多種抗生素治療；②患者免疫功能低下。故本試驗(yàn)陰性時(shí)，不宜匆忙地否定診斷。

傷寒傷人不同病期血、糞便、尿液中病原菌與特異性凝集素的陽性檢出率（圖9-1）。

圖9－1傷寒病程中各種試驗(yàn)陽性率

（三）傷寒帶菌者的檢查

最可靠的方法是分離培養(yǎng)病原菌，但檢出率不高。一般可先檢測可疑血清中有無Vi抗體，當(dāng)效價(jià)>1：10時(shí)，再取糞便或尿液多次分離培養(yǎng)，才能確定。