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燈盞花中所含的三種單體成分——咖啡酸、東莨菪內(nèi)酯、野黃芩苷均能促進(jìn)體外培養(yǎng)的視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞存活,且以咖啡酸活性最強(qiáng)。日前,由成都中醫(yī)藥大學(xué)的張藝等人完成的一項國家自然科學(xué)基金課題為將燈盞花拓展應(yīng)用于青光眼的治療提供了實驗依據(jù)。
青光眼是以視盤呈典型凹陷及視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞死亡為特征的眼病。目前青光眼的治療局限于降低眼壓,尚缺乏有效的保護(hù)視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞(RN)的藥物。燈盞花主要含有以野黃芩苷為主的黃酮、香豆素、酚酸類等化合物,具有散寒解表,活血舒筋,止痛消積等功效,臨床廣泛用于治療高血壓、心律失常及心絞痛。隨著對其藥理研究的深入,燈盞花的應(yīng)用范圍正在拓展,青光眼的治療就是一例。但其保護(hù)RN的具體成分尚不明確。
本研究以燈盞花中的咖啡酸、東莨菪內(nèi)酯、野黃芩苷為對象,觀察它們對體外培養(yǎng)的視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞存活的影響。具體做法是:采用胰酶消化法將18只出生2~3天的乳鼠視網(wǎng)膜制成細(xì)胞懸液,接種于經(jīng)多聚鳥氨酸(HA)和層黏連蛋白(LN)包被的96孔板中;于培養(yǎng)3天后,分別加入等滲磷酸鹽緩沖液及不同含量的咖啡
酸、東莨菪內(nèi)酯、野黃芩苷溶液繼續(xù)培養(yǎng)兩天,采用四唑鹽比色法測量其存活細(xì)胞的吸收值,同時對部分細(xì)胞行Nissei體染色檢查。
Nissei體染色檢查結(jié)果表明,培養(yǎng)5天的存活細(xì)胞大部分為神經(jīng)細(xì)胞,與空白對照組比較,咖啡酸含量在3.9~1000微克/毫升、東莨菪內(nèi)酯、野黃芩苷含量在250~1000微克/毫升時,神經(jīng)細(xì)胞的吸收值均明顯增加(p<0.05,p<0.01),且有一定的量效關(guān)系。說明咖啡酸、東莨菪內(nèi)酯、野黃芩苷三者均能促進(jìn)體外培養(yǎng)的視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞存活,是燈盞細(xì)辛中起視神經(jīng)保護(hù)作用的有效成分,三者中又以咖啡酸活性最強(qiáng)。
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燈盞花中所含的三種單體成分——咖啡酸、東莨菪內(nèi)酯、野黃芩苷均能促進(jìn)體外培養(yǎng)的視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞存活,且以咖啡酸活性最強(qiáng)。日前,由成都中醫(yī)藥大學(xué)的張藝等人完成的一項國家自然科學(xué)基金課題為將燈盞花拓展應(yīng)用于青光眼的治療提供了實驗依據(jù)。
青光眼是以視盤呈典型凹陷及視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞死亡為特征的眼病。目前青光眼的治療局限于降低眼壓,尚缺乏有效的保護(hù)視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞(RN)的藥物。燈盞花主要含有以野黃芩苷為主的黃酮、香豆素、酚酸類等化合物,具有散寒解表,活血舒筋,止痛消積等功效,臨床廣泛用于治療高血壓、心律失常及心絞痛。隨著對其藥理研究的深入,燈盞花的應(yīng)用范圍正在拓展,青光眼的治療就是一例。但其保護(hù)RN的具體成分尚不明確。
本研究以燈盞花中的咖啡酸、東莨菪內(nèi)酯、野黃芩苷為對象,觀察它們對體外培養(yǎng)的視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞存活的影響。具體做法是:采用胰酶消化法將18只出生2~3天的乳鼠視網(wǎng)膜制成細(xì)胞懸液,接種于經(jīng)多聚鳥氨酸(HA)和層黏連蛋白(LN)包被的96孔板中;于培養(yǎng)3天后,分別加入等滲磷酸鹽緩沖液及不同含量的咖啡
酸、東莨菪內(nèi)酯、野黃芩苷溶液繼續(xù)培養(yǎng)兩天,采用四唑鹽比色法測量其存活細(xì)胞的吸收值,同時對部分細(xì)胞行Nissei體染色檢查。
Nissei體染色檢查結(jié)果表明,培養(yǎng)5天的存活細(xì)胞大部分為神經(jīng)細(xì)胞,與空白對照組比較,咖啡酸含量在3.9~1000微克/毫升、東莨菪內(nèi)酯、野黃芩苷含量在250~1000微克/毫升時,神經(jīng)細(xì)胞的吸收值均明顯增加(p<0.05,p<0.01),且有一定的量效關(guān)系。說明咖啡酸、東莨菪內(nèi)酯、野黃芩苷三者均能促進(jìn)體外培養(yǎng)的視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞存活,是燈盞細(xì)辛中起視神經(jīng)保護(hù)作用的有效成分,三者中又以咖啡酸活性最強(qiáng)。