中醫(yī)古籍
  • 《動脈粥樣硬化》 一、分析ApoB基因多態(tài)性的方法

    對ApoB基因多態(tài)性進行檢測、分析的方法很多,如:限制性內切酶的酶譜分析法,PCR直接分析法,PCR產(chǎn)物RFLP分析法,等位基因特異性寡核苷酸(ASO)雜交法等等,其中最多用且簡單的方法有PCR產(chǎn)物直接分析法和PCR產(chǎn)物RFLP分析法。

    PCR產(chǎn)物直接分析法,是采用合適的引物,通過多次擴增,獲得靶基因序列擴增片段,直接分析法片段的大小,可用于分析基因的缺失與插入。這種方法簡便、快速、靈敏,可分析ApoB基因VNTR、SP多態(tài)性。

    基因突變往往會造成限制性內切酶識別位點的改變,如位點丟失或產(chǎn)生新位點,通過PCR擴增某一特定片段,再用限制性內切酶酶切擴增產(chǎn)物,電泳觀察片段的大小,這種方法用于檢測酶切位點改變的基因突變,可直接判斷基因型,是研究ApoB基因PFLPs的較好方法,具有靈敏、簡便、可同時對大量樣品進行分析等優(yōu)點。

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