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Hp的檢測方法目前已有尿素酶試驗、細菌培養(yǎng)、活檢標本切片染色、直接涂片染色、14C呼試驗及免疫學方法等各種測定法。權衡利弊各有優(yōu)缺點。
2.1 尿素酶試驗
該試驗是所有檢測手段中最為簡便迅速的一種方法,在胃鏡檢查同時進行,敏感性和特異性分別達91%和100%時,數分鐘即可做出診斷。檢查結果與直接涂片法、分離培養(yǎng)法、組織病理學結果一致或近似。活檢標本的尿素酶活性主要與感染的數量多少有關,量少時可能造成假性反應,而其它產生尿素酶的細菌也可能造成假陽性,但仍不失為一種最初檢測Hp感染的有效手段。
2.2 細菌培養(yǎng)
胃粘膜組織的細菌培養(yǎng)是診斷Hp感染的最可靠方法,往往做為驗證其它檢測手段的“金標準”。但不少因素可能會影響Hp的培養(yǎng)而致假陰性。如:胃粘膜組織中的Hp的數量過少、細菌繁殖能力差等。
2.3 活檢標本切片染色
將胃粘膜活檢組織標本用100%中性福爾馬林固定,常規(guī)石蠟包埋、切片染色。染色的方法有很多種,主要有Warth-Starry(W-S)染色,改良Giemsa染色,Gresyefast,HE和熒光染色,其中(W-S)染色效果最好,細菌清晰易辨,特異性和敏感性幾乎均達100%。但該法繁瑣且需一定技術。此外HE染色法既可供組織學運用又可檢查Hp。也可做為一種常規(guī)檢測方法。Langdale-Brown等報道用吖啶橙熒光染色,Hp易辨認,且方法簡單、快速,尤其在Hp量少時優(yōu)于W-S和Giemsa染色,不易漏診。
2.4 直接涂片染色
Pinlard用相差顯微鏡直接檢查涂于玻璃片上的胃粘膜查Hp,敏感性達100%。
2.513C14C呼吸試驗
有人利用Hp產生的尿素酶能分解尿素的原理,將胃內用核素標記的尿素分解產生CO2和NH2,CO2被吸收后經肺排出,如果胃粘膜有Hp存在,則呼出氣中就有核素標記的CO2出現。檢測Hp的敏感性和特異性分別達到100%和88%,Hp清除后14CO2呼出減少。Ormand等發(fā)現收集服用核素標記的尿素后20min的呼氣體即可有效地檢測Hp感染。
2.6 免疫學方法
佐貫等采用乳膠凝集試驗檢測血中抗HpIgG抗體,并與組織培養(yǎng)法和鏡檢法進行對照,血中抗Hp抗體與粘膜內Hp檢出一致率為73.1%,特異性為60%~100%,敏感度為81.3%,對Hp感染的篩選診斷具有一定的實用價值。Rathbone等用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)測定73例經胃鏡檢查并活檢確診的患者血清Hp抗體,發(fā)現其敏感性和特異性分別達到93%和97%。Engstrand等建立了檢測Hp的單克隆抗體方法,為診斷Hp感染提供了更為特異的方法。張啟波等利用初步純化的Hp的尿素酶為抗原對120例病人的血清抗Hp抗體進行了ELISA測定,對照細菌培養(yǎng)等方法顯示敏感為95%,特異性為91%。吉林市第222醫(yī)院用血清免疫熒光方法診斷Hp感染,顯示很高的敏感性。浙江醫(yī)科大學用親和素一生物素(ABC)法檢測活檢組中的Hp抗原,可顯著提高診斷的靈敏性。
2.7 其它
Sehneider等報道,讓患者吞入系線膠囊以收集胃內粘液,再通過涂片和尿素酶試驗檢測粘液內的Hp,發(fā)現其特異性、敏感性也很高。郎大裕等用一種添加了尿素的pH指示劑的酚紅,使Hp染色,通過內鏡觀察Hp在人胃內的分布情況,應用本法的30例胃潰瘍患者中26例色素撒布后立即可以見到發(fā)紅現象。全部病例都可在發(fā)紅的部位檢出Hp。
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Hp的檢測方法目前已有尿素酶試驗、細菌培養(yǎng)、活檢標本切片染色、直接涂片染色、14C呼試驗及免疫學方法等各種測定法。權衡利弊各有優(yōu)缺點。
2.1 尿素酶試驗
該試驗是所有檢測手段中最為簡便迅速的一種方法,在胃鏡檢查同時進行,敏感性和特異性分別達91%和100%時,數分鐘即可做出診斷。檢查結果與直接涂片法、分離培養(yǎng)法、組織病理學結果一致或近似。活檢標本的尿素酶活性主要與感染的數量多少有關,量少時可能造成假性反應,而其它產生尿素酶的細菌也可能造成假陽性,但仍不失為一種最初檢測Hp感染的有效手段。
2.2 細菌培養(yǎng)
胃粘膜組織的細菌培養(yǎng)是診斷Hp感染的最可靠方法,往往做為驗證其它檢測手段的“金標準”。但不少因素可能會影響Hp的培養(yǎng)而致假陰性。如:胃粘膜組織中的Hp的數量過少、細菌繁殖能力差等。
2.3 活檢標本切片染色
將胃粘膜活檢組織標本用100%中性福爾馬林固定,常規(guī)石蠟包埋、切片染色。染色的方法有很多種,主要有Warth-Starry(W-S)染色,改良Giemsa染色,Gresyefast,HE和熒光染色,其中(W-S)染色效果最好,細菌清晰易辨,特異性和敏感性幾乎均達100%。但該法繁瑣且需一定技術。此外HE染色法既可供組織學運用又可檢查Hp。也可做為一種常規(guī)檢測方法。Langdale-Brown等報道用吖啶橙熒光染色,Hp易辨認,且方法簡單、快速,尤其在Hp量少時優(yōu)于W-S和Giemsa染色,不易漏診。
2.4 直接涂片染色
Pinlard用相差顯微鏡直接檢查涂于玻璃片上的胃粘膜查Hp,敏感性達100%。
2.513C14C呼吸試驗
有人利用Hp產生的尿素酶能分解尿素的原理,將胃內用核素標記的尿素分解產生CO2和NH2,CO2被吸收后經肺排出,如果胃粘膜有Hp存在,則呼出氣中就有核素標記的CO2出現。檢測Hp的敏感性和特異性分別達到100%和88%,Hp清除后14CO2呼出減少。Ormand等發(fā)現收集服用核素標記的尿素后20min的呼氣體即可有效地檢測Hp感染。
2.6 免疫學方法
佐貫等采用乳膠凝集試驗檢測血中抗HpIgG抗體,并與組織培養(yǎng)法和鏡檢法進行對照,血中抗Hp抗體與粘膜內Hp檢出一致率為73.1%,特異性為60%~100%,敏感度為81.3%,對Hp感染的篩選診斷具有一定的實用價值。Rathbone等用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)測定73例經胃鏡檢查并活檢確診的患者血清Hp抗體,發(fā)現其敏感性和特異性分別達到93%和97%。Engstrand等建立了檢測Hp的單克隆抗體方法,為診斷Hp感染提供了更為特異的方法。張啟波等利用初步純化的Hp的尿素酶為抗原對120例病人的血清抗Hp抗體進行了ELISA測定,對照細菌培養(yǎng)等方法顯示敏感為95%,特異性為91%。吉林市第222醫(yī)院用血清免疫熒光方法診斷Hp感染,顯示很高的敏感性。浙江醫(yī)科大學用親和素一生物素(ABC)法檢測活檢組中的Hp抗原,可顯著提高診斷的靈敏性。
2.7 其它
Sehneider等報道,讓患者吞入系線膠囊以收集胃內粘液,再通過涂片和尿素酶試驗檢測粘液內的Hp,發(fā)現其特異性、敏感性也很高。郎大裕等用一種添加了尿素的pH指示劑的酚紅,使Hp染色,通過內鏡觀察Hp在人胃內的分布情況,應用本法的30例胃潰瘍患者中26例色素撒布后立即可以見到發(fā)紅現象。全部病例都可在發(fā)紅的部位檢出Hp。