《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》 四、微生物學(xué)檢查

（一）病原學(xué)檢查

發(fā)病一周內(nèi)取血液，第二周以后取尿，有腦膜炎型癥狀者取腦脊液進(jìn)行檢查。

1．顯微鏡檢查 直接鏡檢： 取抗凝血1000轉(zhuǎn)/分、離心10分鐘，除去血細(xì)胞；血漿再以10000轉(zhuǎn)/分，離心40分鐘，棄上清取沉淀物暗視野顯微鏡檢查。染色鏡檢：涂片后用Fontana鍍銀染色鏡檢。另外，還可用免疫熒光法或免疫酶染色法檢查。

2．分離培養(yǎng)與鑒定 將血液數(shù)滴接種于柯氏（Korthoff）培養(yǎng)基（4.5～5ml），每份標(biāo)本接種2～3管，于30℃培養(yǎng)5天，每隔3～5天，用暗視野顯微鏡檢查一次。如有鉤體生長(zhǎng)，再傳代培養(yǎng)，用生長(zhǎng)良好的菌液作鑒定，陰性者至少培養(yǎng)30～40天，仍未查到才能報(bào)告。尿液標(biāo)本一般需濃縮（離心）后培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)需加抑菌劑如5-氟尿嘧啶等；也可將標(biāo)本接種于豚鼠腹腔進(jìn)行分離。

（二）血清學(xué)試驗(yàn)

一般在病初及發(fā)病2～3周各采血一次進(jìn)行下列試驗(yàn)。

1．顯微鏡凝集試驗(yàn)

是目前常用的方法，用標(biāo)準(zhǔn)株或當(dāng)?shù)爻Ｒ娋骺乖?，分別與病人不同稀釋度的血清混合，在37℃作用2小時(shí)，然后滴片作暗視野顯微檢查。若待檢血清中有某型抗體存在，則在同型抗原孔中可見鉤體凝集成團(tuán)，形如小蜘蛛，一般病人凝集效價(jià)在1：400以上或晚期血清比早期血清效價(jià)高4倍以上有診斷意義。

2．間接凝集試驗(yàn)將鉤體屬特異性抗原吸附于載體上成為具有鉤體屬特異性的顆?？乖Ｓ玫妮d體有綿羊紅細(xì)胞、活性炭、乳膠顆粒等，這些抗原致敏的顆粒在玻片上與病人血清中相應(yīng)的抗體作用，可出現(xiàn)肉眼可見的凝集。此法敏感性差，但快速簡(jiǎn)便，尤其是炭凝集及乳膠凝集試驗(yàn)，適于基層醫(yī)療單位作鉤體病的輔助診斷。

另外，補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、間接免疫熒光試驗(yàn)、ELISA等血清學(xué)方法亦可用于診斷。